"XWLC-05 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:肺癌;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
XWLC-05 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
Madison lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-279細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞、K 562細(xì)胞
Farage細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
XWLC-05 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長,及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、OE-33細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞
mRMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞、SK-GT-2細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
P3X63 AG8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細(xì)胞、HMEC細(xì)胞、HELF細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
Y3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLN205細(xì)胞、MuM-2B細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞
HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞
BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
XWLC-05 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞
H-1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCO細(xì)胞、CHP 212細(xì)胞、MCFs細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
C6661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞
SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
Giant Cell Tumor細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L- cell細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞、E.L.4細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
RA.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TT細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
ECC12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-EBNA細(xì)胞、U-118 MG細(xì)胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
TALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO76細(xì)胞、293-H細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
TALL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞、SW837細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞
Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細(xì)胞、DU_145細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
SF 295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 453細(xì)胞、SW-1116細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞
C8166-CD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細(xì)胞、CAL 27細(xì)胞、SMMC 7721細(xì)胞
CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞
ZYM-SVEC01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細(xì)胞、HOS-143B細(xì)胞、KTCTL-140細(xì)胞
MV4II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞
H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細(xì)胞、TW01細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞
EAhy926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞
RS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
alpha-TC1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-527細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞、SLK細(xì)胞
LS 174 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WILL2細(xì)胞、HepG2-luc細(xì)胞、MPP89細(xì)胞
NK-92.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D-Cl3細(xì)胞、H1573細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞
SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
SUPT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN14B細(xì)胞、Hs852T細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
Panc 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47-D細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞、Pan02細(xì)胞
HMC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1Sq細(xì)胞、CG-4細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞
XWLC-05 Adherent人肺腺癌細(xì)胞系
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
GFP-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細(xì)胞、AML 12細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞
H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞
UPCI:SCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞、HSC3細(xì)胞
HFB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞
MHCC 97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26 WT細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞
Hs675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞
Detroit562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6細(xì)胞、H460細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞
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