"SRA01/04 Adherent永生化人晶狀體上皮細胞系
細胞背景資料：晶狀體；上皮細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SRA01/04 Adherent永生化人晶狀體上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要。現(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-RC 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞
Kato-III細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
細胞生長特性：貼壁
SRA01/04 Adherent永生化人晶狀體上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
HEK-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞
H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
SW 962細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
KYSE 410細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
Nthy-ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細胞、LLC-PK(1)細胞、IPEC1細胞
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
SRA01/04 Adherent永生化人晶狀體上皮細胞系
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
IOSE-Mar細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-A細胞、GM02132細胞、SEG1細胞
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
COR-L26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ 138細胞、Psi2 DAP細胞、JB-6細胞
Kit225-K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細胞、Okayama University Medical School-27細胞、HeLa.S3細胞
NOR 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
SU 86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
SKNSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
OC-316細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75_1細胞、HT-115細胞、alpha-TC1.6細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
Balb/3T3-4-Cl31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-5細胞、Tb1.Lu細胞、CHG5細胞
HS688AT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
Rat1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細胞、HPaSteC(HPSC)細胞、SW 780細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
UMRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D/cl3細胞、Malme3M細胞、HBZY-1細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
ChaGo-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
Vero C1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206F細胞、SU 86.86細胞、TW01細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
TE671/RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
NIT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞
C-4I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMF細胞、YH-13細胞、Pa18C細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
SRA01/04 Adherent永生化人晶狀體上皮細胞系
HSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
SL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
Human podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
Glioma 261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431細胞、KYSE450細胞、WM 115細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
RH-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2452細胞、Psi2-DAP細胞、H498細胞
CCK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-B3細胞、IOSE29細胞、NCI H23細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細胞、GC-2細胞、LTEP-s細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細胞、H1672細胞、CHO細胞
JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1417細胞、HTR-8/SV neo細胞、SNU1040細胞
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