"MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:骨髓增生異常綜合征;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
SK BR 03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3NIH細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞
EFM19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
EJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞
H-2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-12細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
MBT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY-A8細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞、EC109細(xì)胞
Ca 9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2 BBe細(xì)胞、CHL細(xì)胞、CHP212細(xì)胞
ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細(xì)胞、RA 1細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
SUM149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細(xì)胞、PA317細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞
Cor L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細(xì)胞、8305C細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
H-1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-42細(xì)胞、CAL-78細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞
CBRH-7919細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞、BT20細(xì)胞
OCI-AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細(xì)胞、MC9細(xì)胞、SW 837細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
ARH77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細(xì)胞、SNU407細(xì)胞、P19細(xì)胞
X63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPASMC細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞、SU4細(xì)胞
KY-50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞
IPLB-Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞、KYSE-510細(xì)胞
HPDE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC2細(xì)胞、CTSC-3細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞
Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞
IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細(xì)胞、NCI-H146細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B10BR細(xì)胞、C-33A細(xì)胞、HuH 6細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
MDCK.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
CCLP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細(xì)胞、CORL51細(xì)胞、A20細(xì)胞
CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、T-98G細(xì)胞、FLS細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
JM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞
SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞
32D-Cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FT-293細(xì)胞、Co 115細(xì)胞、H1581細(xì)胞
ARPE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞、U 937細(xì)胞、IM 9細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
MDA-MB-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
GM04679細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細(xì)胞、CO115細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞
MUTZ-1 Adherent人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞系
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
LCLC-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞
BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI3B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞
RIN-14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Uhth-74細(xì)胞、TE11細(xì)胞、TE10細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、NCI-H1651細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細(xì)胞、MN60細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞
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