"MUTZ-1 Cell:人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:骨髓增生異常綜合征;女性
451-LU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
KU.812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774A.1細胞、Hi-five細胞、HEK-293-H細胞
U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MUTZ-1 Cell:人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細胞,每一次的消化都是對這個細胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細胞間隙明顯,細胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低,保證細胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標(biāo)準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
SUM-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
細胞生長特性:懸浮
MUTZ-1 Cell:人骨髓增生異常綜合征細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
SLMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
MUTZ-1 Cell:人骨髓增生異常綜合征細胞系
159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞
HT-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
NCI H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
PG-4 S+L-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細胞、SW-780細胞、HSC-3細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
HOP 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU886細胞、NCI-SNU-16細胞、H-1105細胞
ARH-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細胞、NCI-N87細胞、HEK/EBNA細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
GM07404D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
SKRC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1618細胞、Ra No. 1細胞、NK-92MI細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
HCa/16A3-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEP1細胞、CCK-81細胞、RA.1細胞
LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞
Chang liver細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-7細胞、IB-RS2細胞、L-6TG細胞
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
QGP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細胞、MT-2J細胞、LS-180細胞
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
bEnd3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
BALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
CHL-CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
HCC2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7402細胞、CCD-33Co細胞、B16/F0細胞
MUTZ-1 Cell:人骨髓增生異常綜合征細胞系
Psi2 DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH128細胞、A9(Hamprecht)細胞、ML2細胞
CAL148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞
Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞
MC26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
SNU387細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3L1細胞、SNU739細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞
OCI-Ly 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADP細胞、MOLT3細胞、MDA-MB-436細胞
NCIH1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
A375-S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、SU-DHL-16細胞、C8166細胞
X63Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
GM03569D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211H細胞、NCIH2170細胞、GalK1細胞
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