"VMM39 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
VMM39 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
RCC10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95C細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞、MIO-M1細(xì)胞
HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92_1_7細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
VMM39 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
B95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細(xì)胞、CoC1細(xì)胞、118MG細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞
MCF7/WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB134VI細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞、C26細(xì)胞
LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞
BEL 7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo205細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
THPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞、HS940細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
HuP-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細(xì)胞、OCI/AML-2細(xì)胞、EL4細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞
VMM39 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
BJ [Human fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2591細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞
BHP 10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞
GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞
HCC0366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF/Adr細(xì)胞、RN-c細(xì)胞、NTC200細(xì)胞
LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1500細(xì)胞、UCLA-SO-M14細(xì)胞、H-35細(xì)胞
NCI H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
KM H-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1838細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞、AZ521細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY7細(xì)胞、HO-8910PM細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
Hs 888.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細(xì)胞、LC-MS細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞
Rat podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239-A細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞、CHL-1細(xì)胞
COLO-680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
SK-RC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoMeT-ccRcc細(xì)胞、U87細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞
Hs895T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
HM06.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H847細(xì)胞、H2029細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞
U-343-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-27細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞、H1568細(xì)胞
rRMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC-8細(xì)胞、751-NA細(xì)胞、U 937細(xì)胞
Kit225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
MC3T3E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc10.05細(xì)胞、RH7777細(xì)胞、UT7細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞
JS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O RCC細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞、CHP-126細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
VMM39 Adherent人黑色素瘤細(xì)胞系
95D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCUM-1細(xì)胞、C4-2細(xì)胞、NTHY-ORI3.1細(xì)胞
H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
H-711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03570細(xì)胞、SNK1細(xì)胞、NIT-1細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞
HCC-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細(xì)胞、HBL100細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
HD-LM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC 20細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞
NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 451-Lu細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞
SNU-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC-34細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞
"