"VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:黑色素瘤;神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移;男性 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞 Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞 H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞 細胞生長:貼壁 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KMS-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 Hs68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細胞、OCI-LY-1細胞、M21細胞 MB-49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT29細胞、KOPN-8細胞、UC-3細胞 MDAMB134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R2C細胞、HCC0015細胞、RPMI 1846細胞 KLM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞 LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞 GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞 Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251_MG細胞、NHRF細胞、HT-3細胞 CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞 HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞 EBC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞 SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞 SHIN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細胞、N2a細胞、HTR8細胞 H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 HEK293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細胞、LM2-4175細胞、PL12細胞 NCI-H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞 VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hce8693細胞、Calu3細胞、IGROV 1細胞 SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞 H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞 BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞 BGC-823細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa17C細胞、7404細胞、H-2106細胞 TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞 NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞 CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞 A375-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞 HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞 Cor L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞 Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞 T-47D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:149 PT細胞、HT115細胞、BCaP-37細胞 PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞 3T3-L1 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞 Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞 HTR-8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV-90細胞、hCMEC/D3細胞、PC-12細胞 EMT-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞 COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞 NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞 LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞 MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞 alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞 FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞 Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞 Colo16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBMEC細胞、NCIH520細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞 BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞 NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細胞、Strain V細胞、B16細胞 159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞 NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞 SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞 DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞 NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞 REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞 COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞 PGLH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞 CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞 Hs 274.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU.812細胞、HECV細胞、NCIH23細胞 H283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 Bl細胞、beta TC6細胞、Gerner 7666細胞 MDA-MB 468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373細胞、SKMEL5細胞、ARPE19細胞 NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞 COLO357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞 LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞 M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞 HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞 Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞 VMM39 epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞 IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、SP2細胞、J82 COT細胞 NIH 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細胞、PC 61-5-3細胞、HFLS細胞 GM03573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、U373細胞、LICR-HN-6細胞 "
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