"TE 671 Adherent人胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞背景資料:胚胎性橫紋肌肉瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE 671 Adherent人胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產品:NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
A549 ATCC細胞系相關產品:ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
LIM-1215細胞系相關產品:PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
D-341細胞系相關產品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
HT 29細胞系相關產品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
NCI-SNU-878細胞系相關產品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
細胞生長特性:貼壁
TE 671 Adherent人胚胎橫紋肌瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
HCC-1438細胞系相關產品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
MH-S細胞系相關產品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、PC12(高分化)細胞、KE39細胞
GC9811-P細胞系相關產品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
CEM/0細胞系相關產品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
ARIP細胞系相關產品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關產品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
RPMI1788細胞系相關產品:NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
HL-7702細胞系相關產品:Ly3細胞、H508細胞、BPH1細胞
SUSM-1細胞系相關產品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
COLO 678細胞系相關產品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
NCIH2141細胞系相關產品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞
Jeko1細胞系相關產品:Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品:ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
TE 671 Adherent人胚胎橫紋肌瘤細胞系
FU-MMT-1細胞系相關產品:KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
HCA7細胞系相關產品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
SJCRH30細胞系相關產品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
SJCRH30細胞系相關產品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
3T3F442A細胞系相關產品:Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
Molm14細胞系相關產品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
SCCVII/St細胞系相關產品:Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞
CCD-112CoN細胞系相關產品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
HANK-1細胞系相關產品:HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
OsA-CL細胞系相關產品:TE11細胞、TE6細胞、NRK 52E細胞
H-2591細胞系相關產品:HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
IMCD3細胞系相關產品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
HSAS4細胞系相關產品:A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
U-118MG細胞系相關產品:PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關產品:NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
P3HR1-BL細胞系相關產品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
MonoMac 6細胞系相關產品:MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
102PT細胞系相關產品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
TU 686細胞系相關產品:NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
Malme3M細胞系相關產品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞
EBC-1細胞系相關產品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
MDA-361細胞系相關產品:MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
BHK21細胞系相關產品:MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞
KM-12細胞系相關產品:T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
Panc-813細胞系相關產品:IA-LM細胞、PCI:SG-231細胞、OE-19細胞
Soleus clone 8細胞系相關產品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
BCPAP細胞系相關產品:NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
MDA-MB436細胞系相關產品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
COLO 201細胞系相關產品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
C-33A細胞系相關產品:NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
Panc_03_27細胞系相關產品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
NCI-H460細胞系相關產品:SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
253JB-V細胞系相關產品:OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細胞系相關產品:BJAB細胞、SKUT1細胞、B16F1細胞
NCIH2196細胞系相關產品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
TO175T細胞系相關產品:CMT167細胞、U-343 MG細胞、LM TK negative細胞
H661細胞系相關產品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
OCI/AML2細胞系相關產品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
AU-Mel細胞系相關產品:RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
2PK3細胞系相關產品:NIH 3T6細胞、Lewis-Lung細胞、NTERA2D1細胞
L M (TK-)細胞系相關產品:UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
AAV293細胞系相關產品:COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
TE 671 Adherent人胚胎橫紋肌瘤細胞系
B4G12細胞系相關產品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
MC116細胞系相關產品:Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
SUM-102細胞系相關產品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞
NALM-6-M1細胞系相關產品:HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
HS-294細胞系相關產品:KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
SUD-4細胞系相關產品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
IMR 32細胞系相關產品:RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
RPTEC TERT1細胞系相關產品:786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
KLE細胞系相關產品:Chinese Hamster Ovary細胞、T-CAM2細胞、Madison lung細胞
HeLa細胞系相關產品:Panc2_03細胞、SKES1細胞、G-401細胞
NTERA-2 clone D1細胞系相關產品:NCI-H226細胞、WM115F細胞、CA922細胞
GC9811-P細胞系相關產品:Anip973細胞、UWB1.289+BRCA1細胞、MCFs細胞
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