"TE 671 Cell:人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:胚胎性橫紋肌肉瘤;女性
LOU-NH-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞
DI TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2172細(xì)胞、HREC細(xì)胞、ATDC5細(xì)胞
NCI-H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-8細(xì)胞、MIA-PaCa-2細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞
HHUA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TE 671 Cell:人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC-19細(xì)胞、MNNG-HOS細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞
LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞
PAN 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞
NCIH1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1650_CO細(xì)胞、JS1細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
TE 671 Cell:人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
NCIH2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞、LA 4細(xì)胞
TK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM3細(xì)胞、PC-3M細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞
MOLT.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞、WM239A細(xì)胞
184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞
Vero 76 clone E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO 27細(xì)胞、HMCB細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞
TE 671 Cell:人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞
TERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-55細(xì)胞、GM00637I細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞
149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-4細(xì)胞、NCIH2405細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
NCIH1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞、HRA19細(xì)胞
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞
GLC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCMK2細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、He-La細(xì)胞
Ku812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159PT細(xì)胞、GC-2細(xì)胞、CD-18細(xì)胞
H-295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞、UCH1細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
COLO684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞
H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞
D407 RPE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細(xì)胞、SuDHL 10細(xì)胞、GM05384細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
EL 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178Y細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞
SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
IGR-OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細(xì)胞、EMT6細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞
SKLU01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239細(xì)胞、MM-1S細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
BSC-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞
SK-N-BE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞
HDSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細(xì)胞、MHH-CALL-2細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞
SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞
BC3 H1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-27細(xì)胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細(xì)胞、LAC細(xì)胞
D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞
GFP-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細(xì)胞、AML 12細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
NCI-H2108細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 684細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
TE 671 Cell:人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞系
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞、PA1細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細(xì)胞、OV-90細(xì)胞、FDCP1細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
NCIH661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YTMLC-90細(xì)胞、H1618細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細(xì)胞、INS-1E細(xì)胞、H889細(xì)胞
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