"MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：乳腺癌
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
MS-751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1184細(xì)胞、COLO.205細(xì)胞、H847細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
NBL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-039細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
NCI-H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 403細(xì)胞、NCI-H820細(xì)胞、MFC細(xì)胞
NCL-H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM13細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
NCI-H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1618細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞、T 24細(xì)胞
NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
GM01232細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞
SUM149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細(xì)胞、PA317細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞
OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞
PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞
CHP-212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞
REC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-82細(xì)胞、MDA-MB 361細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞
NCI-H2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞、ISHI細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
KYSE 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2108細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
KG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細(xì)胞、Hs 895.T細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
COLO320/DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞、GOTO細(xì)胞
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞
OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞
GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞
JiyoyeP-2003細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA SO M14細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞、Panc813細(xì)胞
NCI-H446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 451-Lu細(xì)胞、TALL1細(xì)胞、H-226細(xì)胞
MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞
K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RPMI2650細(xì)胞、H-1568細(xì)胞
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
KHYG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cates 1B細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞、H2172細(xì)胞
A2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG1細(xì)胞、Sf21細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞
SGC996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
MDA330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
MDA-MB-435 Adherent人乳腺癌細(xì)胞系
Panc02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
U343細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK AD293細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、SKNBE(2)細(xì)胞
YES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞
9L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞
TEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、LM3細(xì)胞
WI38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細(xì)胞、WC00059細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞
A431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS688AT細(xì)胞、H740細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞
H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、H1341細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
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