1.細(xì)胞起源:
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 MDA-MB-435S
細(xì)胞別稱 MDA-MB-435s; MDA-MB-435 S; MDA-MB-435-S; MDAMB435S;BrCL15
細(xì)胞背景描述 MDA-MB-435S細(xì)胞是一種紡錘形的細(xì)胞,1976年由其親本MDA-MB-435細(xì)胞中篩選得到。MDA-MB-435細(xì)胞是從31歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導(dǎo)管腺癌女性患者胸水中分離得到。當(dāng)用熒光染料對(duì)微管蛋白進(jìn)行染色時(shí),親本細(xì)胞顯現(xiàn)散布特征(Ⅱ型)。最近通過cDNA陣列研究表明,親本(MDA-MB-435細(xì)胞)可歸入黑素瘤起源。
供體年齡 女;31歲
組織來源 乳腺;乳房;導(dǎo)管;導(dǎo)管癌;胸腺滲出液
細(xì)胞形態(tài) 紡錘形細(xì)胞
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 乳腺癌細(xì)胞
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
2.培養(yǎng)及保藏:
完全培養(yǎng)基 Leibovitz's L-15(PM151010)+0.01mg/ml Insulin+0.01mg/mL
Glutathione+10% FBS(164210-50)+1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣,95%;CO 2,5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法:
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液;
2、加入2ml左右PBS,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄;
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞;
4、放入培養(yǎng)箱消化,顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止,全程不要拍打培養(yǎng)瓶;
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液;
6、收集細(xì)胞懸液離心,1200rpm/min 3分鐘,離心完吸出上清丟棄;
7、加入新鮮培養(yǎng)基,吹打幾下混勻細(xì)胞即可,按比例接種到新培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)基,擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
傳代比例(密度) 1:3-1:4
換液頻次 2~3次/周
本產(chǎn)品僅供科研使用。不能用于人和動(dòng)物治療等其它臨床診斷使用!以實(shí)際收貨產(chǎn)品說明書為準(zhǔn),網(wǎng)站說明書僅供參考。