"JKT-1 Adherent人精原瘤細胞系
細胞背景資料：精原瘤；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
JKT-1 Adherent人精原瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
HEK-293 c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：brain-derived Endothelial cells.3細胞、Caki2細胞、GES-1細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
Ca 9-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
細胞生長特性：貼壁
JKT-1 Adherent人精原瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Hs 445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OP9細胞、TK.10細胞、H-1963細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
P3X63 Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
Hep G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
SKml2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/X63-Ag8細胞、C-32細胞、MOLM16細胞
HS578細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
CV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 1112SK細胞、HCPEpiC細胞、WiDrTC細胞
MDA-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-CTRL細胞、C-28/I2細胞、MFE-280細胞
TOV21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
Beta-TC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細胞、2T細胞、OCI-Ly10細胞
JKT-1 Adherent人精原瘤細胞系
Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
H-2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細胞、NCCIT細胞、JJN-3細胞
BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞
GLC82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
A2780CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
HCC1954BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HA1800細胞、S-16細胞、LOU-NH-91細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
H-2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞
Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
CORL88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
C2-C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
HEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
H-1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
HS578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
Colon 26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye (P-2003)細胞、Ramos細胞、MHCC97細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
MC 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細胞、KFB細胞、MH-S細胞
H-250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
HuH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
JKT-1 Adherent人精原瘤細胞系
Hs888Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 829細胞、Y79細胞、SUM52PE細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
A172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細胞、H-1048細胞、SPCA-1細胞
Psi-2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
DMS79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-1細胞、SK MES 1細胞、BGC-823細胞
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細胞、RMS1598細胞、HDQ-P1細胞
DB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGB細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、130T細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、H220細胞、GM07404D細胞
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