"IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細胞系
細胞背景資料：卵巢；上皮細胞；SV４０轉化；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
OAW-42細胞系相關產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關產(chǎn)品：HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
NS-20Y細胞系相關產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Human podocyte細胞系相關產(chǎn)品：L(TK-)細胞、ECC12細胞、Daoy細胞
UM-UC14細胞系相關產(chǎn)品：NCIH510細胞、OVCAR 8細胞、Psi2-DAP細胞
184A1細胞系相關產(chǎn)品：Hep 3B2_1-7細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞、RK13細胞
細胞生長特性：貼壁
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
AM細胞系相關產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
SNU119細胞系相關產(chǎn)品：MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
HLCL9B10細胞系相關產(chǎn)品：HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞
GP2-293細胞系相關產(chǎn)品：AM38細胞、COLO320-DM細胞、NCI-H1944細胞
HS 1.Tes細胞系相關產(chǎn)品：MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
SaOS細胞系相關產(chǎn)品：EA.Hy926細胞、RPMI #8226細胞、CWR22R-V1細胞
H3255_DA細胞系相關產(chǎn)品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
RCK8細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
MC-3T3細胞系相關產(chǎn)品：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關產(chǎn)品：SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
Pfeiffer細胞系相關產(chǎn)品：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
NCI-H1522細胞系相關產(chǎn)品：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
HS-5細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細胞系
RPMI 8402細胞系相關產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
VMM5細胞系相關產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
VM-CUB-1細胞系相關產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
VM-CUB-1細胞系相關產(chǎn)品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
RPE D407細胞系相關產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
Ku812細胞系相關產(chǎn)品：VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
4T1-LUC細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
TE 32細胞系相關產(chǎn)品：Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞
LN229細胞系相關產(chǎn)品：Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞
SK MEL 5細胞系相關產(chǎn)品：OVCA 420細胞、AKR細胞、Case 3細胞
PTK-2細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
TE3細胞系相關產(chǎn)品：HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞系相關產(chǎn)品：SK-MES1細胞、P3.653細胞、Human Embryonic Skin細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關產(chǎn)品：My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞系相關產(chǎn)品：H-676B細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞、RIN-m 14B細胞
SW1573細胞系相關產(chǎn)品：JEKO細胞、MOLM-16細胞、Hs1.Tes細胞
NCIH2405細胞系相關產(chǎn)品：H-865細胞、SHG 44細胞、143TK-細胞
OAW-42細胞系相關產(chǎn)品：SKNDZ細胞、Granta519細胞、NCIH2085細胞
NTERA2D1細胞系相關產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
PC3M細胞系相關產(chǎn)品：BMSC/hBMSCs細胞、KM12SM細胞、PNT-1A細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
OLN93細胞系相關產(chǎn)品：Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
OCI-Ly18細胞系相關產(chǎn)品：HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
M-O7e細胞系相關產(chǎn)品：HCE-T細胞、EFO27細胞、NCIH548細胞
DLD 1細胞系相關產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
PJ34細胞系相關產(chǎn)品：P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞
hOMF細胞系相關產(chǎn)品：Nthy ori 3.1細胞、JM-1細胞、OV 2008細胞
PC9細胞系相關產(chǎn)品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
Sp2/O細胞系相關產(chǎn)品：X63-AG 8.653細胞、OUMS-23細胞、SCC4細胞
AU-Mel細胞系相關產(chǎn)品：RKO-AS45-1細胞、B 95-8細胞、NCI-157細胞
SW-954細胞系相關產(chǎn)品：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
Japanese Tissue Culture-28細胞系相關產(chǎn)品：HuH-28細胞、Pa18C細胞、Molm14細胞
CT26.WT細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
Reuber H35細胞系相關產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
P30 OHK細胞系相關產(chǎn)品：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
RSC-364細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H-128細胞、KMBC細胞、MES-SA細胞
GOTO細胞系相關產(chǎn)品：MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞
A431細胞系相關產(chǎn)品：HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
SU 86.86細胞系相關產(chǎn)品：UWB1.289細胞、HEK-293 c18細胞、Hs840_T細胞
NuTu-19細胞系相關產(chǎn)品：SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞
IOSE-80 Adherent人正常卵巢上皮細胞系
Hs675細胞系相關產(chǎn)品：H-1755細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞、Panc 1細胞
HNE-1細胞系相關產(chǎn)品：SP-2細胞、DMS 79細胞、NCI-SNU-119細胞
HEK/293細胞系相關產(chǎn)品：VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞
MM.1S細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
SR細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
RPTEC TERT1細胞系相關產(chǎn)品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
EFM-19細胞系相關產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
H2347細胞系相關產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
SCC9細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2135細胞、NCI-H1734細胞、NCI-H2009細胞
SN12C-PM6細胞系相關產(chǎn)品：NBL-5細胞、NCIH1693細胞、CHO K1細胞
HL-7702細胞系相關產(chǎn)品：Ly3細胞、74Int細胞、AHH1細胞
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