"alphaTC1 Clone 6 Adherent小鼠胰島素瘤胰島a細胞系
細胞背景資料:胰島素瘤;a細胞;C57BL/6xDBA/2
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
alphaTC1 Clone 6 Adherent小鼠胰島素瘤胰島a細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因實驗需要,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
SCL I細胞系相關產(chǎn)品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
L23/P細胞系相關產(chǎn)品:ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDA-MB436細胞系相關產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
CHL-CL-11細胞系相關產(chǎn)品:AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
NCI-841細胞系相關產(chǎn)品:AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
細胞生長特性:貼壁
alphaTC1 Clone 6 Adherent小鼠胰島素瘤胰島a細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
LIXC002細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
CCD-112CoN細胞系相關產(chǎn)品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞
NCIH196細胞系相關產(chǎn)品:YES 2細胞、AZ521細胞、ZR75-1細胞
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關產(chǎn)品:C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
H2107細胞系相關產(chǎn)品:38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
U118MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
Pa14C細胞系相關產(chǎn)品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞
OACP4C細胞系相關產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、EOC 20細胞、NB-4細胞
NCI-H1563細胞系相關產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
H2444細胞系相關產(chǎn)品:H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
ARPE-19細胞系相關產(chǎn)品:CoCL3細胞、TMK-1細胞、MDA 1386細胞
HCC-2108細胞系相關產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
HEK-293H細胞系相關產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
alphaTC1 Clone 6 Adherent小鼠胰島素瘤胰島a細胞系
HCoEpiC細胞系相關產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
OCI-Ly18細胞系相關產(chǎn)品:HCC9724細胞、C-643細胞、LoVo細胞
B16F0細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
B16F0細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
BEL-7402細胞系相關產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
BEND細胞系相關產(chǎn)品:SJ-Rh 30細胞、HBMEC細胞、MOLP-2細胞
22Rv-1細胞系相關產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
HCT15細胞系相關產(chǎn)品:P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
MV4:11細胞系相關產(chǎn)品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
OUMS-27細胞系相關產(chǎn)品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
NCI-SNU-520細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
NCI-H1238細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
A 375細胞系相關產(chǎn)品:Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
SKNFI細胞系相關產(chǎn)品:Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
C38細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL1細胞、NCI-H441-4細胞、RBL 2H3細胞
H2227細胞系相關產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞
L 363細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
OAC-P4C細胞系相關產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
HSAS1細胞系相關產(chǎn)品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞
UACC-893細胞系相關產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
CORL51細胞系相關產(chǎn)品:H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
MUVEC細胞系相關產(chǎn)品:SCC-25細胞、MOLT-3細胞、SNB19細胞
N1E115細胞系相關產(chǎn)品:ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
H719細胞系相關產(chǎn)品:CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
OVHM細胞系相關產(chǎn)品:MV-522細胞、NCIH1963細胞、H9c2(2-1)細胞
SUDHL1細胞系相關產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞
SW1463細胞系相關產(chǎn)品:H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
YAC-1細胞系相關產(chǎn)品:THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
CAL 27細胞系相關產(chǎn)品:NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
HPAF II細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞
WEHI164細胞系相關產(chǎn)品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
L 363細胞系相關產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
H-2141細胞系相關產(chǎn)品:67NR細胞、TK10細胞、bEND.3細胞
Molm 14細胞系相關產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
Molm 14細胞系相關產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
NCI-H2444細胞系相關產(chǎn)品:MPC-5細胞、NCI-H2009細胞、KPL4細胞
MEL細胞系相關產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
HS 1.Tes細胞系相關產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
Dakiki細胞系相關產(chǎn)品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
alphaTC1 Clone 6 Adherent小鼠胰島素瘤胰島a細胞系
NCI-H526細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
HSMC細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-596細胞、Kasumi-1細胞、NCI-SNU-C2A細胞
Hs294細胞系相關產(chǎn)品:HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品:BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
HBL1細胞系相關產(chǎn)品:U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關產(chǎn)品:EFO 27細胞、HMCB細胞、PaTu-8988s細胞
SKHEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SNT-8細胞、NCI-H1436細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞
SK-MEL28細胞系相關產(chǎn)品:Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
HCC-1954細胞系相關產(chǎn)品:CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
NCI-H1792細胞系相關產(chǎn)品:MA 104細胞、HOS-TE85細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
JHH2細胞系相關產(chǎn)品:DMS 153細胞、HNE2細胞、OCI AML3細胞
NCIH196細胞系相關產(chǎn)品:YES 2細胞、C4I細胞、BJ [Human fibroblast]細胞
"