"RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:胰島β細(xì)胞瘤;雄性;NEDH
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無(wú)色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
SL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cates-1B細(xì)胞、NCI-H2347細(xì)胞、TFK1細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCM356細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK II細(xì)胞、REC1細(xì)胞、AK細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說(shuō)明書
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說(shuō)當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
LS411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
CAL-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
SK-GT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-407細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、H-774細(xì)胞
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
J774.A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS114細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
YAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-2細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
GES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細(xì)胞、PC-14細(xì)胞、GI-1細(xì)胞
TK-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞、Hep2細(xì)胞
RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞
SK-LU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 3細(xì)胞、LN 382細(xì)胞、211H細(xì)胞
SCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A673細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞、Lewis Lung細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
H-1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HIE-2細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞
TKB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細(xì)胞、GM05862細(xì)胞、NCI-H1694細(xì)胞
H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco2BBe細(xì)胞、MBVP細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04671細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞、CW2細(xì)胞
NCI/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM-88細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞、L-cell細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細(xì)胞、M619細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
H-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞、GB-1細(xì)胞
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞
KYSE-150細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細(xì)胞、74Int細(xì)胞、Ly1細(xì)胞
UWB1289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2780 CP細(xì)胞、Panc_05_04細(xì)胞、NCIH2081細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
IEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-EBNA細(xì)胞、COR-L23細(xì)胞、ME-180細(xì)胞
H-2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML4細(xì)胞、HCC827細(xì)胞、H-128細(xì)胞
PG-4(S+L-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細(xì)胞、NCI-H157細(xì)胞、VCaP細(xì)胞
Med 283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT5A細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞、MS751細(xì)胞
RIN-m5F Adherent大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞系
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
ECC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116細(xì)胞、AM-38細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞
IOSE-Mar細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞
GOS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細(xì)胞、H-28細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞
LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 739.T細(xì)胞、KTC1細(xì)胞、TE-13細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon26細(xì)胞、143 B細(xì)胞、LS123細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、EM3細(xì)胞
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