"BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：子宮內(nèi)膜；上皮細(xì)胞；雌性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動作輕，避免晃動。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
HCa/16A3-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEP1細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞、RA.1細(xì)胞
LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、MHCC97細(xì)胞、T-98G細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
BT-474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細(xì)胞、Ly10細(xì)胞、BC-028細(xì)胞
MEL-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tj-905細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞、WILL2細(xì)胞
H-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-82細(xì)胞、RT-4細(xì)胞、B16F0細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
SLMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、SNU1細(xì)胞、BV173細(xì)胞
SK-N-BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB157細(xì)胞、NCI-H64細(xì)胞、J-111細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
HT-144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC-1細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞、Line 522細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
MC-3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
CHAGOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-3細(xì)胞、NCIH1417細(xì)胞、H322T細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
Bx-PC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832T細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、L78細(xì)胞
NCI H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC78細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
451-LU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138 MG細(xì)胞、LY-R細(xì)胞、HOP92細(xì)胞
KU.812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774A.1細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞、HEK-293-H細(xì)胞
U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞
MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞
UK Pan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPMEC細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞、RBE4細(xì)胞
WBF344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細(xì)胞、TF-1細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞
SUM-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG 9細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞
HOP 62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU886細(xì)胞、NCI-SNU-16細(xì)胞、H-1105細(xì)胞
ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
GM07404D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1838細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞、KP2細(xì)胞
SKRC-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1618細(xì)胞、Ra No. 1細(xì)胞、NK-92MI細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
NCI-SNU-387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細(xì)胞、SK-BR-3細(xì)胞、Y1細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞
JeKo 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-2細(xì)胞、TE-8細(xì)胞、hOMF細(xì)胞
NCI-H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞、LCLC103H細(xì)胞
bEnd3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-7細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞
HTR8/SVneo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS7細(xì)胞、P19細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞
L-6 myoblast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞
Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞
T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞
RA-FLSs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細(xì)胞、ZR75-30細(xì)胞、L6細(xì)胞
BALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien 133細(xì)胞、HEH2細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
CHL-CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE1201細(xì)胞、H-2228細(xì)胞、H125細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
BE2M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞
NCTC clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞
MA-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rin-M-5F細(xì)胞、RT4-D6P2T細(xì)胞、UMR106細(xì)胞
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
Psi2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH128細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞、ML2細(xì)胞
CAL148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895T細(xì)胞、QG-56細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞
BEND Adherent牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
OCI-Ly 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADP細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
A375-S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
GM03569D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211H細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
PANC 1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEP2D細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、CCC-HEL-1細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251-MG細(xì)胞、Hs940T細(xì)胞、A101D細(xì)胞
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