"BEND Cell:牛子宮內膜上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:子宮內膜;上皮細胞;雌性
T98G細胞系相關產品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關產品:H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
VMRCLCD細胞系相關產品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞
T47-D細胞系相關產品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BEND Cell:牛子宮內膜上皮細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關于培養(yǎng)瓶內加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態(tài)也比內好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
OCI-AML-5細胞系相關產品:SNU398細胞、16HBE細胞、SK-N-BE(2C)細胞
CCD1112Sk細胞系相關產品:NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞
AU 565細胞系相關產品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關產品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
U138MG細胞系相關產品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
細胞生長特性:貼壁
BEND Cell:牛子宮內膜上皮細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HuH7細胞系相關產品:CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
KCL-22細胞系相關產品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
NCIH1436細胞系相關產品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
SK-MEL-31細胞系相關產品:CHO cell clone K1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞、PC 61.5.3細胞
Madison細胞系相關產品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
HIT T15細胞系相關產品:SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
PG-BE1細胞系相關產品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
BEND Cell:牛子宮內膜上皮細胞系
H1573細胞系相關產品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
MEG01細胞系相關產品:OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
Tb 1-Lu細胞系相關產品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
Hut292細胞系相關產品:H650細胞、GM3569細胞、H-841細胞
rUCMSCs細胞系相關產品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
293 F細胞系相關產品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
RPMI 7666細胞系相關產品:DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
H2170細胞系相關產品:MBdSMC細胞、IM95細胞、MADB 106細胞
TE-85細胞系相關產品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
TE-85細胞系相關產品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
MC-26細胞系相關產品:HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
Y 1細胞系相關產品:MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞
N-9細胞系相關產品:PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
TW 01細胞系相關產品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
DMS-273細胞系相關產品:Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
LNCaP細胞系相關產品:Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
CAL-39細胞系相關產品:B16 subline B78細胞、EA.hy 926細胞、MC-3T3-E1細胞
COR L279細胞系相關產品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關產品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
LOU-NH-91細胞系相關產品:MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
Hs737T細胞系相關產品:KLN 205細胞、MDAMB468細胞、HA細胞
HOS (TE85)細胞系相關產品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
FRO 81-2細胞系相關產品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞
NE1細胞系相關產品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
D-283 Med細胞系相關產品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
HT144-mel細胞系相關產品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
H1573細胞系相關產品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關產品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
WEHI3B細胞系相關產品:OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
HCC-2279細胞系相關產品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
IGROV-1細胞系相關產品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
SNU-869細胞系相關產品:P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
RBMVEC細胞系相關產品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
H-1755細胞系相關產品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
SW1222細胞系相關產品:HRA 19細胞、Normal Rat Kidney-49F細胞、HCC941122細胞
NK-92 MI細胞系相關產品:H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
LTPA細胞系相關產品:NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
CAL62細胞系相關產品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
SK-N-BE(2)C細胞系相關產品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞
H2.35細胞系相關產品:LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
H2.35細胞系相關產品:LNT-229細胞、CCD1112Sk細胞、Karpas 299細胞
NCI H226細胞系相關產品:Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
639V細胞系相關產品:Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
BEND Cell:牛子宮內膜上皮細胞系
BEL7402細胞系相關產品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
HGSMC細胞系相關產品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
WEHI3細胞系相關產品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
FU-OV-1細胞系相關產品:NCIH526細胞、MDA-MB-231-GFP細胞、U-CH1細胞
HuH7細胞系相關產品:CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
TE671細胞系相關產品:AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
HOS (TE85)細胞系相關產品:H4-IIE-C3細胞、HT-1080細胞、PANC-08-13細胞
ARPE19細胞系相關產品:Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
MDA-MB231細胞系相關產品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
WM239A細胞系相關產品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞
A-2780細胞系相關產品:H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞
Rat Glomerular Endothelial細胞系相關產品:NCIH747細胞、MDA-361細胞、Leukemia 1210細胞
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關鍵字: BEND Cell:牛子宮內膜上皮細胞系
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