"McA-RH7777 Adherent大鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：肝癌；雌性；Buffalo
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
McA-RH7777 Adherent大鼠肝癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣，考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異，有時因寄贈、交換和購買，培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室，的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?，F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-７０℃~-１９６℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是：在-７０℃以下時，細胞內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止狀態(tài)，故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵，在于通過０~２０℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi)，水晶呈針狀，極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇：凍存細胞較脆弱，要輕柔操作。凍存細胞要快速融化，并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感，離心去除凍存培養(yǎng)基，然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。１ml凍存細胞使用１０~２０ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù)，細胞接種應(yīng)該至少在３×１０(５)活細胞/ml；培養(yǎng)細胞１２到２４小時，更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基，去除凍存劑。離心方法：取出貯存細胞，３７℃水浴中快速融化；把１到２ml凍存細胞加入到大約２５ml完全生長培養(yǎng)基，輕輕混勻；以大約８０x離心２到３分鐘；棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞，并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板，細胞接種應(yīng)該至少為３×１０(５)活細胞/ml。細胞的分化：一個成年人全身細胞總數(shù)約１０１２個，可以區(qū)分為２００多種不同類型的細胞：形態(tài)結(jié)構(gòu)，代謝，行為，功能等各不相同。追根溯源，這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以，通常把發(fā)育過程中，細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段，也發(fā)生在胎兒出生以后，乃至成人階段。例如，人體血細胞的產(chǎn)生和分化，這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞，轉(zhuǎn)入分化，通常從細胞周期中G１期開始時一個確定的點G０點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞，它們的基因表達和代謝活動各不相同。
BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C-33 A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
Psi2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
SK.MEL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞
細胞生長特性：貼壁
McA-RH7777 Adherent大鼠肝癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
D-324MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
NCIH1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC1-SPG細胞、S3-HeLa細胞、Hs 636 T細胞
A-704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞
CL40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞
SuDHL 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細胞、Duck embryo細胞、SK-MEL-28細胞
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
HIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
McA-RH7777 Adherent大鼠肝癌細胞系
HuH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH4細胞、LS 513細胞、PTK-2細胞
Microbiological Associates-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
MUTZ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8細胞、Human Epithelioma-2細胞、HITT15細胞
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
TEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.CL2細胞、SK Mel 2細胞、LM3細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
CaSki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
CWR22R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
CAL-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細胞、HMVEC細胞、MC3T3細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞
RK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CALU 1細胞、Hep II細胞、MES-23.5細胞
Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
THC-8307細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細胞、SW-403細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞
H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
RPMI 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-611-T細胞、AML-2細胞、HT-1197細胞
ACC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-8細胞、GM637細胞、EFO27細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
Swiss-3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
OVCAR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
L-6TG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
Hs 737.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 F細胞、BT細胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細胞
Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞
McA-RH7777 Adherent大鼠肝癌細胞系
LS-513細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
YES 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU520細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SUM-159細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney細胞、PL11細胞、Fu97細胞
CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞
E304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR-786細胞、3LL細胞、U138細胞
CHP100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-5細胞、NCI-1155細胞、PLB985細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、PLC/PRF/5細胞、SACC-LM細胞
Vero 76 clone E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFO 27細胞、BTI-Tn5B14細胞、FUOV1細胞
A-704細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細胞、HT1197細胞、Kit-225-K6細胞
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