"McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：肝癌；雌性；Buffalo
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
UPCI:SCC90細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat (clone E6-1)細胞、NCIH1155細胞、GM00637B細胞
RCC10 RGB細胞系相關產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
CEM-0細胞系相關產(chǎn)品：33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
細胞生長：貼壁
McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-7細胞、T 98 G細胞、HEL9217細胞
B16 BL6細胞系相關產(chǎn)品：KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
C643細胞系相關產(chǎn)品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
HOS TE 85細胞系相關產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
PIG3細胞系相關產(chǎn)品：HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
CORL88細胞系相關產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
NCI H226細胞系相關產(chǎn)品：Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC78細胞、BAR-T細胞
MNNG/HOS細胞系相關產(chǎn)品：H2195細胞、Hs-852-T細胞、OCI-LY-3細胞
YD-15細胞系相關產(chǎn)品：Ketr3細胞、NSC34細胞、Panc-10.05細胞
LLC-MK2細胞系相關產(chǎn)品：Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
NCIH2081細胞系相關產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
CAL 33細胞系相關產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
ML2細胞系相關產(chǎn)品：HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
CFPAC1細胞系相關產(chǎn)品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
HeLa S3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系
3T3-L1 ad細胞系相關產(chǎn)品：D-283 Med細胞、Hs 819.T細胞、H2009細胞
QGY7703細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
MPC-83細胞系相關產(chǎn)品：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
HDLM2細胞系相關產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
PC 12細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
CNE-2細胞系相關產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
CNE-2細胞系相關產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
Alexander cells細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
SCC 25細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
H-526細胞系相關產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
J82COT細胞系相關產(chǎn)品：SK MES 1細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞、SJCRH30細胞
FM88細胞系相關產(chǎn)品：BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞
GCT細胞系相關產(chǎn)品：BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
CoC1細胞系相關產(chǎn)品：D324細胞、L540細胞、74Int細胞
L132細胞系相關產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
Hs832T細胞系相關產(chǎn)品：PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
Karpas299細胞系相關產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
A375-MEL細胞系相關產(chǎn)品：Hs 746.T細胞、SKLU-1細胞、Porcine Kidney-15細胞
LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品：HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞
COLO-741細胞系相關產(chǎn)品：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
C-Lu65細胞系相關產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
LA-N-5細胞系相關產(chǎn)品：Merwin Plasma Cell tumor-11細胞、NIH:OVCAR-8細胞、LAD-2細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
MN-9D細胞系相關產(chǎn)品：Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞
GI-1細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-10細胞、SW-1088細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞
Swiss-3T3細胞系相關產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
Mhh-Call 2細胞系相關產(chǎn)品：GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
LK2細胞系相關產(chǎn)品：H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
IMCD3細胞系相關產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
RPTEC/TERT 1細胞系相關產(chǎn)品：RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞
BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品：H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞
HFLS-RA細胞系相關產(chǎn)品：Evsa-T細胞、J774 A.1細胞、RAW 264.7細胞
FU-MMT-1細胞系相關產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
NBL_S細胞系相關產(chǎn)品：KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞
OsACL細胞系相關產(chǎn)品：Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
HEY A8細胞系相關產(chǎn)品：ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
MSTO-211 H細胞系相關產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
MIO-M1細胞系相關產(chǎn)品：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞
MMVECs細胞系相關產(chǎn)品：MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
A549ATCC細胞系相關產(chǎn)品：H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
KRCY細胞系相關產(chǎn)品：MDCK-II細胞、Ly18細胞、MDA231-LM2細胞
L 132細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
Jurkat-FHCRC細胞系相關產(chǎn)品：SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產(chǎn)品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產(chǎn)品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
SKLU-1細胞系相關產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
A2780CP細胞系相關產(chǎn)品：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
HEC-1-A細胞系相關產(chǎn)品：WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
McA-RH7777 epithelioid cells大鼠肝癌細胞系
BEL 7405細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞
NCI-H2452細胞系相關產(chǎn)品：SKMEL28細胞、HIT細胞、COLO824細胞
RKOE6細胞系相關產(chǎn)品：SUM 190PT細胞、MeT5A細胞、HEL 92.1.7細胞
MNNG/HOS細胞系相關產(chǎn)品：H2195細胞、MGH-U3細胞、RCC_7860細胞
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