"M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
JeKo-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM2細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞、H1734細(xì)胞
Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞
H2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-562細(xì)胞、P560細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞
WRL68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283細(xì)胞、H-2107細(xì)胞、LC-2/ad細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
U 138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-MEL細(xì)胞、R-1059-D細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞、COLO394細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
CALU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細(xì)胞、NCI H226細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞
H-1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細(xì)胞、BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SK-N-AS細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
Panc02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞
M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細(xì)胞系
16-HBE14o細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12-PM6細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞
RL95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞
A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
MGH-U1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML2細(xì)胞、IM-9細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞
D283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL3細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、Det 562細(xì)胞
RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞
GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV 1細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞
HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
HSC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP 92細(xì)胞、Dami細(xì)胞、SNU620細(xì)胞
OCI AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 839細(xì)胞、MOLP-8細(xì)胞、OVISE細(xì)胞
NCI H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1092細(xì)胞、RERFLCMS細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞
H9c2 (2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT clone H9細(xì)胞、SKRC-52細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
L363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細(xì)胞、H1568細(xì)胞、S180細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
M20 [Human melanoma] Adherent人胚胎皮膚細(xì)胞系
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
HuH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-120細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞、M 1細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞
BI-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG-1細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞、SW.620細(xì)胞
HDMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs895.T細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
NS1-Ag 4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、SF295細(xì)胞、LAC細(xì)胞
CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
NFHIOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞、SW13細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
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