產(chǎn)品名稱：人胚胎皮膚細(xì)胞M20
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無血清凍存液（貨號：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 |
培養(yǎng)備注 | 用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng) |
人胚胎皮膚細(xì)胞M20收到后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的完全培養(yǎng)基）
人胚胎皮膚細(xì)胞M20培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a）、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司官網(wǎng)貨號：C7001）
1、細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入完全培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人胚胎皮膚細(xì)胞M20部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2588 BNL1MEA7R1 小鼠肝上皮細(xì)胞BNL1MEA.7R.1
YS2589 HCC78 人肺腺癌細(xì)胞HCC78
YS2590 HM 人小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞HM
YS2591 CTV1 人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CTV1
YS2592 GDM1 人急性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞GDM1
YS2593 LADMAC 小鼠骨髓淋巴細(xì)胞LADMAC
YS2594 EOC20 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞EOC20
YS2595 BMSCsmBMSCs 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMSCsmBMSCs
YS2596 HSMC 人骨骼肌細(xì)胞HSMC
YS2597 VSMC 大鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞VSMC
YS2598 CCCHHM2 人胚心肌組織來源細(xì)胞CCCHHM2
YS2599 HCFB 人心肌成纖維細(xì)胞HCFB
YS2600 HMSC 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞HMSC
YS2601 M20 人胚胎皮膚細(xì)胞M20
YS2602 HNEpC 人鼻粘膜上皮細(xì)胞HNEpC
YS2603 HFTF 人胚胎眼Tenon＇s囊成纖維細(xì)胞HFTF
YS2604 MSC 豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞MSC
YS2605 Ratpodocyte 大鼠腎足細(xì)胞Ratpodocyte
YS2606 HCM 人心肌細(xì)胞HCM
YS2607 Malme3M 人惡性黑色素瘤細(xì)胞Malme3M
YS2608 HCV29 人膀胱上皮細(xì)胞HCV29
YS2609 HOPC 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞HOPC
YS2610 KM12 人結(jié)腸癌細(xì)胞KM12
YS2611 HMVEC 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞HMVEC
YS2612 KYSE270 人食管鱗癌細(xì)胞KYSE270
YS2613 Nb2 大鼠淋巴瘤細(xì)胞Nb2
YS2614 MSCs 小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞MSCs
YS2615 HFLS 人滑膜成纖維細(xì)胞HFLS
YS2616 HepaRG 人肝癌細(xì)胞HepaRG
YS2617 HUASMC 人臍動脈平滑肌細(xì)胞HUASMC
YS2618 rHSC99 大鼠肝星狀細(xì)胞rHSC99
YS2619 MPC83 小鼠胰腺腺泡細(xì)胞MPC83
YS2620 MNFS60 小鼠髓性白血病細(xì)胞MNFS60
YS2621 RIMEC 鼠腸粘膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞RIMEC
YS2622 U138MG 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U138MG
YS2623 LAN1 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞LAN1
更多細(xì)胞請咨詢我們：人胚胎皮膚細(xì)胞M20
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實業(yè)”、“GTX” 品牌。通過公司各部門員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)擁有較高知名度，深得新老客戶厚愛，本著“優(yōu)質(zhì)、服務(wù)、信譽”的精神，堅持以優(yōu)良的技術(shù)、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、良好的信譽為國內(nèi)外廣大用戶提供優(yōu)質(zhì)生物產(chǎn)品和服務(wù)。
公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時，也建立了一套集技術(shù)支持，物流售后服務(wù)等多部門聯(lián)動服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個客戶，雅吉生物的試劑盒，在國內(nèi)眾多重點實驗室廣泛使用，深受廣大科研人員好評，先后在權(quán)威雜志文章中被引用。
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