"NCI-H820 Adherent人乳頭狀肺腺癌細胞系
細胞背景資料:乳頭狀肺腺癌;淋巴結轉移;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H820 Adherent人乳頭狀肺腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
WEHI 3B細胞系相關產(chǎn)品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
DB細胞系相關產(chǎn)品:RGB細胞、NBL-3細胞、HEL299細胞
JEG3細胞系相關產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KNS-62細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品:HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
RT-BM-1細胞系相關產(chǎn)品:HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
細胞生長特性:貼壁
NCI-H820 Adherent人乳頭狀肺腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
NCI-H820細胞系相關產(chǎn)品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
HLEC-B3細胞系相關產(chǎn)品:MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
RSC 96細胞系相關產(chǎn)品:Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
TGHAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞
KLM1細胞系相關產(chǎn)品:EU-4細胞、ESC-410細胞、NCIH2110細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品:RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
P3-x63-Ag8 653細胞系相關產(chǎn)品:H23細胞、NCIH2126細胞、MV3細胞
HCC1143細胞系相關產(chǎn)品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
ChaGo-K1細胞系相關產(chǎn)品:U-118 MG細胞、MDA-330細胞、alpha TC1.6細胞
SGC996細胞系相關產(chǎn)品:HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞
SKM-1細胞系相關產(chǎn)品:HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞
Hs934T細胞系相關產(chǎn)品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
NCI-H820 Adherent人乳頭狀肺腺癌細胞系
HEK293F細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
MDCKII-WT細胞系相關產(chǎn)品:MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞
H69C細胞系相關產(chǎn)品:H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞
H69C細胞系相關產(chǎn)品:H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞
Hs-578-T細胞系相關產(chǎn)品:H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞
INS1細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
YH-13細胞系相關產(chǎn)品:HEp-2細胞、NT2細胞、SHEE細胞
SJCRH30細胞系相關產(chǎn)品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
JeKo-1細胞系相關產(chǎn)品:UM2細胞、BCP-1細胞、H1734細胞
GM00637H細胞系相關產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
Hs840T細胞系相關產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
MDA-134細胞系相關產(chǎn)品:CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
WEHI 231細胞系相關產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
LSECs細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
T-HEECs細胞系相關產(chǎn)品:QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
SUM52PE細胞系相關產(chǎn)品:AtT-20細胞、451Lu細胞、JM1細胞
TM3細胞系相關產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
CNE-1細胞系相關產(chǎn)品:HPBALL細胞、SUSM1細胞、IA-LM細胞
GM03190細胞系相關產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
SBC-3細胞系相關產(chǎn)品:HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
Clone Y-1細胞系相關產(chǎn)品:C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
PC-9S1細胞系相關產(chǎn)品:TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
CAL 51細胞系相關產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
AR-42J細胞系相關產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
SUSM-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
NCI-H-128細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
MV4II細胞系相關產(chǎn)品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
MPC5細胞系相關產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
GM-3573細胞系相關產(chǎn)品:CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
BEL-7405細胞系相關產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
A-2058細胞系相關產(chǎn)品:U-2-OS細胞、MC-3T3細胞、PK15細胞
526-mel細胞系相關產(chǎn)品:MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
LS-513細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞
U-373MG ATCC細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
NCI-H2009細胞系相關產(chǎn)品:CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
OAW 42細胞系相關產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
TE-3A細胞系相關產(chǎn)品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
Tu177細胞系相關產(chǎn)品:CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
FAK+/+細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
NCI-H820 Adherent人乳頭狀肺腺癌細胞系
SC1細胞系相關產(chǎn)品:H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
Hs294T細胞系相關產(chǎn)品:MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
H-2195細胞系相關產(chǎn)品:H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞
IEC 18細胞系相關產(chǎn)品:H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞
T8細胞系相關產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
OV2008細胞系相關產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
SK UT 1細胞系相關產(chǎn)品:SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
QG-56細胞系相關產(chǎn)品:SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
BL2141細胞系相關產(chǎn)品:CAL148細胞、ssMCF-7細胞、NCI/ADR-RES細胞
BC-024細胞系相關產(chǎn)品:MGH-UI細胞、Hs832.Tc細胞、578T細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、QG-56細胞、HCC-44細胞
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