"HuH-28 Adherent人膽管癌細胞系
細胞背景資料：肝內(nèi)膽管癌
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HuH-28 Adherent人膽管癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
OV3121細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
細胞生長特性：貼壁
HuH-28 Adherent人膽管癌細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-3573細胞、A375-MEL細胞、Hs-281-T細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
MDA-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞
SUM159細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細胞、GM02132C細胞、SK-RC 42細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞
GM06141細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞
Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞
HuH-28 Adherent人膽管癌細胞系
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
H-1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HIE-2細胞、BERH-2細胞、UCLA NPA871細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
COLO320HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2110細胞、SuDHL 4細胞、H2073細胞
H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
JIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468細胞、LS1034細胞、3D4/21細胞
MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
KCL22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
LAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC 7901細胞、CFSC-8B細胞、Panc 5.04細胞
OCI-LY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 445細胞、L6細胞、SMMC7721細胞
SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
PC 61-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
IB-RS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1417細胞、MKN-45細胞、OUMS-23細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
Clone Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細胞、RPE1-hTERT細胞、H1876細胞
OCILY7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-520細胞、PT-67細胞、Hs839T細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
NOMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細胞、Evsa T細胞、Kit 225 K6細胞
L-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞
KYSE-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs604T細胞、Calu 3細胞、SW 620細胞
751-NA-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細胞、SW 480細胞、KYSE 70細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
ACC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
NIHOVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
SC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細胞、3AO細胞、RH30SJ細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
HuH-28 Adherent人膽管癌細胞系
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
Giant Cell Tumor細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L- cell細胞、NCI-H69細胞、E.L.4細胞
SKN-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞
HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
MDA 231-LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞、Ca761細胞、H719細胞
HcaF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
LN 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMVEC細胞、HCA-7細胞、Calu-6細胞
HECCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K422細胞、COLO206F細胞、Co 115細胞
Fu97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC/Y細胞、SC細胞、OVCAR432細胞
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