"184A1 Adherent人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:乳腺上皮細(xì)胞;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
184A1 Adherent人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。
253J-Bladder-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞
ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞
SKLMS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細(xì)胞、ASPC1細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
184A1 Adherent人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
D341MD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞
ABE8.1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞
HuTu 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細(xì)胞、MPC-83細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SNGM細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞
HCMEC(BL12-H)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、AMO-1細(xì)胞
TE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞、BrCL18細(xì)胞
NCIH2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞
H-660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63細(xì)胞、WM266mel細(xì)胞、Y3-Ag123細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
CCD1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H711細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞、MM134細(xì)胞
184A1 Adherent人乳腺上皮細(xì)胞系
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
YD-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr3細(xì)胞、NSC34細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細(xì)胞、H1781細(xì)胞、GM3569細(xì)胞
MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞
KMBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-28細(xì)胞、TE 85 ClF-5細(xì)胞、Neukoplast細(xì)胞
SK-NM-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVSMC細(xì)胞、WM 2664細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞
LNCaP subline C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss3T3細(xì)胞、SK_HEP1細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞
Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞
NCTC-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1417細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞、HO8910PM細(xì)胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞
CEM clone 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKM-1細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞、SW-620細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
KU-812-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細(xì)胞、Mevo細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞
FTC-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C1細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞、NSC34細(xì)胞
MDA-MB-175VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2108細(xì)胞、SF767細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
H-2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-PAP細(xì)胞、GTL16細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
ROS-17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞
H-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細(xì)胞、EOC20細(xì)胞、RBL 1細(xì)胞
T-98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320DM細(xì)胞、TC7細(xì)胞、MV-522細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
OVTOKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細(xì)胞、Tn 5B1-4細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞
184A1 Adherent人乳腺上皮細(xì)胞系
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
67NR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細(xì)胞、H2195細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
CCLP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS0578T細(xì)胞、P3X63-Ag8.653細(xì)胞、F442-A細(xì)胞
Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞
hTERT-RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細(xì)胞、STTG1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞
P30/OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-HN13細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、EMT-6細(xì)胞
HT-29/CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR1-K細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、U251MG細(xì)胞
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