"HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞由E.V.Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立,培養(yǎng)出來的細(xì)胞染色體組型在第7代時就不正常;電鏡照片顯示有微絲、張力原纖維和橋粒;Southern轉(zhuǎn)移表明有整合型SV40病毒基因,當(dāng)作正常細(xì)胞。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說,針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因:細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多,細(xì)胞老化;2)細(xì)胞的接種量:接種量過低,細(xì)胞生長緩慢;3)細(xì)胞傳代時間過晚:細(xì)胞中毒,影響傳代后的細(xì)胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細(xì)胞死亡;時間過短,細(xì)胞未完全分離而成團(tuán),細(xì)胞死亡;5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細(xì)胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細(xì)胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細(xì)胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
NeHepLxHT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2A細(xì)胞、SLMT1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞
H-727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞
IPEC-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
PANC-08-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM102細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞
OUMS23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞
MPP89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞
SNG-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL5細(xì)胞、OVCA432細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞
PG13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS細(xì)胞、MDST8細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞
SCaBER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細(xì)胞、RGC6細(xì)胞、L 428細(xì)胞
293/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-180細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞
CAL27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 231細(xì)胞、R.K.13細(xì)胞、TO175T細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
NCI-BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
NCI-H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細(xì)胞、JG細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
CP-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-H細(xì)胞、SNU-5細(xì)胞、UMC-11細(xì)胞
HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、HCC0202細(xì)胞、AC29細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
3T3-J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、C-127細(xì)胞、VK2細(xì)胞
LOUNH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112 CoN細(xì)胞、HSC-T6細(xì)胞、Vx-2細(xì)胞
HSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、MGECs細(xì)胞、NCIH2106細(xì)胞
E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK-4細(xì)胞、293 c18細(xì)胞、143 B細(xì)胞
C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細(xì)胞、GAK細(xì)胞、CII細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
SK Mel28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細(xì)胞、KU 812F細(xì)胞、RWPE-2細(xì)胞
H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞
BEAS2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細(xì)胞、MCA 38細(xì)胞、WM-239-A細(xì)胞
DKMG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞
Ketr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
H-2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-226細(xì)胞、Hs683細(xì)胞、D324 Med細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞
HCA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細(xì)胞、Hep G2-Luc細(xì)胞、PBL細(xì)胞
A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞
CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
YAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-3細(xì)胞、Hu-P-T3細(xì)胞、THP 1細(xì)胞
HUCCT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-343-T細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞
MT-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞
2B4-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNF1細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞、GM04680細(xì)胞
NRK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC2.4細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細(xì)胞系
NCI-SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159細(xì)胞、H-2029細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
MAD109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas422細(xì)胞、S16細(xì)胞、Hs-940細(xì)胞
QGY-7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞
VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細(xì)胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NIHOVCAR3細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、RCC10細(xì)胞
MPP89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNEpC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊,提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。