"SW1353 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞背景資料:骨肉瘤;女性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW1353 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
KM-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細胞、MZCRC1細胞、U-251 MG細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
NCIH2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
HOS-TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
SW 756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
細胞生長特性:貼壁
SW1353 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
Homo sapiens No. 578, breast cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK-1細胞、Ramos.2G6.4C10細胞、COLO 206F細胞
MILE SVEN 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
H2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細胞、NCI-H1568細胞、SW 48細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
HLEB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
SBC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC4006細胞、NCIH716細胞、RM-1細胞
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
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PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
ECC12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
MOLP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
MOLP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
GM16136細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM1細胞、MUS-M1細胞、C3H10T1-2細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
MDA-MB 361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、HUASMC細胞、SF-126細胞
RCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
CCRF.CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
FRO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
Ball 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
CAL 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
LADMAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細胞、MRC 5細胞、FHCRC subclone 11細胞
PC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細胞、NCIH2591細胞、P3X63NS1細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
UCH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞
Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
GM00637H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細胞、SUDHL16細胞、IM-95細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
BE(2)M-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
SW1353 Adherent人軟骨肉瘤細胞系
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
SKNBE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細胞、HCC-1588細胞、NBL_S細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
TFH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
H87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
C3H10T1-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-1細胞、BT 325細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞
U031細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細胞、NBL-3細胞、OVCAR10細胞
IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-398細胞、PANC-1細胞、Evsa T細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C_1細胞、LS-1034細胞、MC116細胞
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