"MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞背景資料：骨肉瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
SK-HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKM-1細胞、MC3T3-E1細胞、rRMECs細胞
PL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CAL-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-51細胞、My-La 2059細胞、NCI-747細胞
S3-HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi-five細胞、RPTEC/TERT 1細胞、HNTEC細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
細胞生長特性：貼壁
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
GM 2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細胞、PLC PRF 5細胞、P1-Raji細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
NCI-H1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS2B細胞、Leukemia 1210細胞、LCLC103H細胞
MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
WM 239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細胞、DLD-1細胞、HCT8細胞
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤細胞系
NOR 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
GRSL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
GRSL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM932細胞、LN-229細胞、NCCIT細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
KYSE-180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
NE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細胞、MGC803細胞、HSC-6細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM細胞、UACC-893細胞、NTera2 cl.D1細胞
COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
MG-HU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞
HOS TE 85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細胞、LI7細胞、MOVAS-1細胞
D324細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
ZR7530細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco2-BBE細胞、293-F細胞、H-1092細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
SU-DHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細胞、H28細胞、A375-MEL細胞
COLO 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192C細胞、MSTO-211H細胞、MES23.5細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
T-HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
H-1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC 96細胞、Fetal Human Lens-124細胞、PLC/PRF/5細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
GM03573A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 5.04細胞、NOMO1細胞、LLC-PK1細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
MNNG/HOS Cl #5 Adherent人骨肉瘤細胞系
COLO 684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細胞、AtT-20細胞、SKMEL2細胞
SK Hep1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-324MED細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞、CCD841CoTr細胞
P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
SGC 7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
TE-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wien-133細胞、Daudi細胞、Wien 133細胞
KYSE-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-453細胞、Kato-III細胞、HEK 293細胞
WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mahlavu細胞、PAI細胞、GM00215A細胞
NFS60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細胞、NGEC細胞、RPMI 1846細胞
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