"DH82 Adherent狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞背景資料：腎；Golden Retrieve
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DH82 Adherent狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉移到液氮中貯存。
CD 18細胞系相關產品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關產品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
Evsa-T細胞系相關產品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
LLC-WRC 256細胞系相關產品：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
CNE2Z細胞系相關產品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
H-1838細胞系相關產品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
細胞生長特性：貼壁
DH82 Adherent狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
A2780S細胞系相關產品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
Jurkat clone A3細胞系相關產品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
HIT.T15細胞系相關產品：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
B16-F0細胞系相關產品：Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
IPLB-SF-21細胞系相關產品：Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
FU-MMT-1細胞系相關產品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
SKNBE-1細胞系相關產品：SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞
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VB細胞系相關產品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
SCL I細胞系相關產品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
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Caov-4細胞系相關產品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
HSAEC1-KT細胞系相關產品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
DH82 Adherent狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
MDA-453細胞系相關產品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
TE 671細胞系相關產品：SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
SKCO1細胞系相關產品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
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HCC1359細胞系相關產品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
KU 812細胞系相關產品：A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞
LL2細胞系相關產品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
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MODE-K細胞系相關產品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
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MUM2B細胞系相關產品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
LAN5細胞系相關產品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
H-1092細胞系相關產品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
CCD 19Lu細胞系相關產品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
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MSTO-211細胞系相關產品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
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Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關產品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
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NCI-H508細胞系相關產品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
Hepa-RG細胞系相關產品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關產品：SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
GalK 1細胞系相關產品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關產品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
MLE-12細胞系相關產品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
Hs895T細胞系相關產品：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
MKN45細胞系相關產品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
SUM 102PT細胞系相關產品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
JROECL 33細胞系相關產品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
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Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
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WiDr/S細胞系相關產品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
WC00044細胞系相關產品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
RKO_AS45細胞系相關產品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
U-2932細胞系相關產品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
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NB1RGB細胞系相關產品：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
COLO.205細胞系相關產品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
SJCRH30細胞系相關產品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
A549細胞系相關產品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
DH82 Adherent狗腎惡性組織細胞增生癥細胞系
OVCAR-433細胞系相關產品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
3T3-A31細胞系相關產品：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
NL20細胞系相關產品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
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MC 3T3-E1細胞系相關產品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
ROS17/2.8細胞系相關產品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
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NCI-H2198細胞系相關產品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
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Reuber H35細胞系相關產品：TC-1[JHU-1]細胞、SBC-3細胞、MOLT-16細胞
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