"Lec1 Adherent倉鼠卵巢細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Lec1 Adherent倉鼠卵巢細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用,近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹(jǐn)慎復(fù)雜,需要的實驗設(shè)備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡,血清中內(nèi)毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高,會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質(zhì)量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉(zhuǎn)放-20℃ 1 hour,再轉(zhuǎn)入-70至-80℃過夜,之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
PLC8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
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細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
Keio University-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF539細胞、RPMI no 8226細胞、IHH-4細胞
C-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-878細胞、NS-1-Ag4-1細胞、J-774A.1細胞
KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1184細胞、UPCI:SCC090細胞、NCIH727細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
NIH:OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細胞、Epstein-Barr-2細胞、SR細胞
NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
L-132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
COV434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
Lec1 Adherent倉鼠卵巢細胞系
Bat lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞
NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
NIH-OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251 MG細胞、Mono-Mac-6細胞、High-5細胞
HT 1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1A細胞、SKNBE(2)細胞、RMG-1細胞
NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞
RAW-264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
NW38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞
PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
NCI-H2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR-RES細胞、COLO206F細胞、K422細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
U266 B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
Tn-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
HPB/ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP-2/0-AG14細胞、H-1299細胞、HGBEC細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
HT-29/CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細胞、PC-3/M細胞、HL60細胞
Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
EAhy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
HBZY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細胞、Mac-1細胞、LS 174T細胞
NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
Human Embryo Kidney-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細胞、JROECL 21細胞、C-26細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
C666-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
AAV-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P19細胞、A1847細胞、HECV細胞
Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細胞、KMH-2細胞、PSN1細胞
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
HOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
Lec1 Adherent倉鼠卵巢細胞系
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
MBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNLMG-B5537SKIN細胞、alphaTC1 Clone 6細胞、UPCI:SCC90細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
Kuramochi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細胞、GM00215細胞、MiaPaCa2細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102PT細胞、Hs839T細胞、Rin-M-5F細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細胞、TI-73細胞、RPMI-8226細胞
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