1.細(xì)胞起源：
細(xì)胞簡稱 Lec1 [Pro-5WgaRI3C]
細(xì)胞別稱 CHO-Lec1; CHO Lec1; Pro-Lec1.3C; Pro-5 Lec1.3c; Pro-5WgaRI3C
細(xì)胞背景描述 Lec1細(xì)胞是從脯氨酸缺陷型的CHO細(xì)胞克隆Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶，從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。Lec1細(xì)胞對于研究N-連接糖基化改變對內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響十分有用。
供體年齡 成年
組織來源 卵巢
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞類型 自發(fā)永生化細(xì)胞
生長特性 貼壁細(xì)胞
生物安全等級 1
2.培養(yǎng)及保藏：
完全培養(yǎng)基 MEMα(PM150421)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)
培養(yǎng)環(huán)境 空氣，95%；CO 2，5%
37℃
凍存條件 55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
液氮
3.傳代方法：
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液；
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄；
3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞；
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液；
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm/min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄；
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時間 2~3分鐘
傳代比例（密度） 1:2-1:4
換液頻次 2~3次/周
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