"PC-3M Adherent人前列腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
PC-3M Adherent人前列腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MOLP-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 742.T細胞、HSC-4細胞、SNU475細胞
CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
細胞生長特性:貼壁生長
PC-3M Adherent人前列腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
Swiss3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6-Swiss albino細胞、NCI-BL6細胞、NCIH661細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
SF 767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細胞、ESC細胞、PE/CA-PJ-34細胞
hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
SK-ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR L279細胞、Sp2/0-Ag14細胞、J 111細胞
SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細胞、SRA01/04 (HLE)細胞、CTLA4 Ig-24細胞
IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
SW 527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
PC-3M Adherent人前列腺癌細胞系
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
Nb2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
WEHI 3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
HCC0827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
H-1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細胞、3T3NIH細胞、HBL-100細胞
H-2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞
A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
HMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞
CFSC-2G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細胞、CCD-18Co細胞、NK 10a細胞
4T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞
LN-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:W256細胞、SVGp12細胞、U-266細胞
Madison細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
BEL-7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5-8F細胞、P-36細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
PC-3M Adherent人前列腺癌細胞系
A-498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Raji細胞、HBSMC細胞、A2780/CP細胞
LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
P3-X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-11細胞、RMS1598細胞、MUTZ-1細胞
HTori-3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞
NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細胞、HMEC-1細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
Hep2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-660細胞、NP69SV40T細胞、U-118MG細胞
SF 767細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細胞、253J-BV細胞、B-104細胞
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