"hs 68 Adherent男性正常龜頭細胞系
細胞背景資料:該細胞1969年由Owens RB建立。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
hs 68 Adherent男性正常龜頭細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞學在生命科學科中起著至關重要的作用,近年來細胞學蓬勃發(fā)展,并取得了重大的進展,細胞實驗室的構建也是各個院校生物學科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復雜,需要的實驗設備種類繁多,下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng):細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水,實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的,而且水中的內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代;內毒素含量過高,會直接導致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾毎麅龃婀苄枰⒓捶庞冢常贰嫠≈锌焖購吞K之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材:細胞實驗中有大量頻繁的移液操作,因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的,而且一次性,用量極大。除上述儀器外,高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
KM12細胞系相關產(chǎn)品:Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞
NCI-H28細胞系相關產(chǎn)品:Nittby-Salford 1細胞、L929(NCTC)細胞、H774細胞
HH [Human lymphoma]細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SP2細胞系相關產(chǎn)品:CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞
NCIH1993細胞系相關產(chǎn)品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
MV3細胞系相關產(chǎn)品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
細胞生長特性:貼壁生長
hs 68 Adherent男性正常龜頭細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。
BE(2)M-17細胞系相關產(chǎn)品:P3X63 AG8-653細胞、GM00637B細胞、50.B1細胞
MES-SA Dx5細胞系相關產(chǎn)品:Hs294細胞、HSC6細胞、C-33 A細胞
HOS-MNNG細胞系相關產(chǎn)品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
T-T細胞系相關產(chǎn)品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
HCC-2218細胞系相關產(chǎn)品:WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
WEHI-231細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
LS 123細胞系相關產(chǎn)品:LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞
DSL6A/C1細胞系相關產(chǎn)品:HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
BT-474細胞系相關產(chǎn)品:T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
T24(ECV304)細胞系相關產(chǎn)品:Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
CoCL2細胞系相關產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、143BTK-細胞、J774A.1細胞
UMC11細胞系相關產(chǎn)品:U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
KMY1022細胞系相關產(chǎn)品:OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
hs 68 Adherent男性正常龜頭細胞系
NCI-H1417細胞系相關產(chǎn)品:KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞
MV522細胞系相關產(chǎn)品:PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
KYSE-180細胞系相關產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
KYSE-180細胞系相關產(chǎn)品:SUM190細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、SKNBE(1)細胞
U-2-OS細胞系相關產(chǎn)品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
C3H-10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品:VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
AN3CA細胞系相關產(chǎn)品:MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
H498細胞系相關產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
Hs688(A)T細胞系相關產(chǎn)品:WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
MDAMB468細胞系相關產(chǎn)品:HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
HCC0044細胞系相關產(chǎn)品:C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
A253細胞系相關產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
COLO680N細胞系相關產(chǎn)品:CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
AD-293細胞系相關產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
P116細胞系相關產(chǎn)品:MH-22a細胞、DMS 114細胞、CHP 126細胞
DU145細胞系相關產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
SK-RC 52細胞系相關產(chǎn)品:BLO11細胞、McCoy細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞
BSC-40細胞系相關產(chǎn)品:MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
H345細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW039細胞、UMR106細胞、P3-X63-Ag8細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關產(chǎn)品:SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品:WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
JEG-3細胞系相關產(chǎn)品:H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
SUM52細胞系相關產(chǎn)品:PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
SCL-II細胞系相關產(chǎn)品:C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
Molm14細胞系相關產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
SRS-82細胞系相關產(chǎn)品:BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
Hs821T細胞系相關產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品:H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
HPAEC細胞系相關產(chǎn)品:Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
QBC939細胞系相關產(chǎn)品:HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
CCD-966SK細胞系相關產(chǎn)品:P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
UACC-812細胞系相關產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞
NOZC-1細胞系相關產(chǎn)品:F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
KYSE 30細胞系相關產(chǎn)品:P3HR1細胞、EA.Hy926細胞、PCI-04B細胞
CMT.64細胞系相關產(chǎn)品:Mv.1.Lu細胞、NCI-H2135細胞、Mel-RM細胞
MeWo細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
OCM-1A細胞系相關產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
BaF3細胞系相關產(chǎn)品:ECV304細胞、NCIH526細胞、H-1437細胞
COLO-741細胞系相關產(chǎn)品:HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
PK(15)細胞系相關產(chǎn)品:SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
hs 68 Adherent男性正常龜頭細胞系
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關產(chǎn)品:GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞
HCC0827細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-8402細胞、3 LL細胞、IBRS-2細胞
HEK293EBNA細胞系相關產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
RAW 264.7細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2172細胞、MFM-223細胞、SK-GT-4細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
DU_145細胞系相關產(chǎn)品:ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
HCC1438細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE-2細胞、OVCA-433細胞、A-673細胞
BT 20細胞系相關產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
TGW-nu-1細胞系相關產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
143TK-細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)C細胞、SUM-52細胞、786-0WT細胞
P3/ag細胞系相關產(chǎn)品:HECCL-1細胞、EVSAT細胞、HMEC細胞
HOSEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Toledo細胞、SW-948細胞、NCI-SNU-520細胞
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