"SNU-878 Adherent人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問題,太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見得太多了,別不當(dāng)會事。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SNU-878 Adherent人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀枞^濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會影響細(xì)胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細(xì)胞、JF305細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞
MFD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
SNU-878 Adherent人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞
P3X63 Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、HHL-5細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞、DH-82細(xì)胞
A375-S2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞、C8166細(xì)胞
WEHI-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
NCI-H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26-clone 25細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞
MESSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M109細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞、L1210細(xì)胞
HLFa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1563細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、H2196細(xì)胞
Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
SNU-878 Adherent人肝癌細(xì)胞系
PY8119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細(xì)胞、LN382細(xì)胞、BC-022細(xì)胞
MCF12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞、TM4細(xì)胞
KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞
McG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞、ECV-304細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞
A-2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2-OS細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞、PK15細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
MDAPCa2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3細(xì)胞、JM1細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞
M059J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞、CFSC-8B細(xì)胞
Molm 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-cloneD1細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞、SK-NSH細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
Hs 729.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-820細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞、WM115mel細(xì)胞
COR-L51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細(xì)胞、MC/9細(xì)胞、LM8細(xì)胞
Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCLCD細(xì)胞、Hs940.T細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞
MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
OCI-Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC9724細(xì)胞、C-643細(xì)胞、LoVo細(xì)胞
A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞
A-673細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2085細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞
HIT clone T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細(xì)胞、SVEC4-10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
JM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞
SHIN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910PM細(xì)胞、H187細(xì)胞、PC 61細(xì)胞
HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞、PLC細(xì)胞
H-735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30/Ohkubo細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
L-Wnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細(xì)胞、A-172細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞
Pt-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
TCC Sup細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 695.T細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞
SNU-878 Adherent人肝癌細(xì)胞系
SK_HEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細(xì)胞、Panc 03.27細(xì)胞、Hk-2細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
ATC241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細(xì)胞、CA922細(xì)胞、MDBK細(xì)胞
Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LU-1細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞、HT 144細(xì)胞
S37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、NCIH716細(xì)胞
COLO_320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK-1細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞、H22細(xì)胞
SN4741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞
T. T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞
MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 19細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS513細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞
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