"SNU-878 epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞 RBL.2H3細胞系相關產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 HTori-3.1細胞系相關產(chǎn)品:BEL-7405細胞、TEC細胞、P3HR-1細胞 細胞生長:貼壁 SNU-878 epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:2傳代 MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 LLCPK1細胞系相關產(chǎn)品:SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞 SNU-638細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T4細胞、VeroC1008細胞、Anip[973]細胞 SNU-251細胞系相關產(chǎn)品:NSC-34細胞、751-NA-15細胞、CPA 47細胞 DMS-153細胞系相關產(chǎn)品:H2052_MM細胞、OV 2008細胞、BJAB細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SNU-878 epithelioid cells人肝癌細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 UACC-812細胞系相關產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞 NOK細胞系相關產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞 HEM細胞系相關產(chǎn)品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞 NCI-H508細胞系相關產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞 J 82細胞系相關產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞 Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 18G3.cl 1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞 McA-RH7777細胞系相關產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞 NCI-H446細胞系相關產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞 BHK 21細胞系相關產(chǎn)品:NBL-1細胞、LLC細胞、HUVEC細胞 SNU-878 epithelioid cells人肝癌細胞系 OSK-1細胞系相關產(chǎn)品:REC-1細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞、A-549細胞 VMRCLCD細胞系相關產(chǎn)品:L-5178-Y-R細胞、PaTu-8988s細胞、Astrocyte type I clone細胞 MDA-436細胞系相關產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞 GM 637細胞系相關產(chǎn)品:TALL 1細胞、MV-1-Lu細胞、HCT15細胞 2V6.11細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞 PLC-PRF-5細胞系相關產(chǎn)品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞 PLC-PRF-5細胞系相關產(chǎn)品:NCIH345細胞、DU 4475細胞、207細胞 Tb1.Lu細胞系相關產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞 GM03569D細胞系相關產(chǎn)品:MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞 NCIH650細胞系相關產(chǎn)品:K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞 FRhK4細胞系相關產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞 SCC 25細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞 CACO2細胞系相關產(chǎn)品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞 OSA細胞系相關產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞 Co 205細胞系相關產(chǎn)品:Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞 UK Pan-1細胞系相關產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞 SW-1463細胞系相關產(chǎn)品:HO1-N-1細胞、MCF.7細胞、BEAS2B細胞 138 MG細胞系相關產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞 NCI-H292細胞系相關產(chǎn)品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞 Ketr3細胞系相關產(chǎn)品:HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞 VB細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞 HR-8348細胞系相關產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞 R 1610細胞系相關產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞 McArdle RH-7777細胞系相關產(chǎn)品:WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞 FRO 81-2細胞系相關產(chǎn)品:hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞 P3-X63-Ag 8.653細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1618細胞、NBLS細胞、TGW細胞 MGHU1細胞系相關產(chǎn)品:WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞 Hs839T細胞系相關產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞 TT細胞系相關產(chǎn)品:IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞 HASMC細胞系相關產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞 PIEC細胞系相關產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞 MCF-10A細胞系相關產(chǎn)品:NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞 ME-180細胞系相關產(chǎn)品:B16BL-6細胞、B16 F1細胞、SJ-Rh 30細胞 hEM15A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 CMT93細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-2細胞、HCS2/8細胞、SK.OV.3細胞 P30/0HK細胞系相關產(chǎn)品:UMUC3細胞、H2107細胞、293 Ad5細胞 U-343細胞系相關產(chǎn)品:P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞 Hs 819.T細胞系相關產(chǎn)品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞 Hs 819.T細胞系相關產(chǎn)品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞 Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞 T-84細胞系相關產(chǎn)品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞 MOLT16細胞系相關產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞 LS411N細胞系相關產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞 SW13細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1436細胞、WERI-Rb1細胞、hTERT-HME-1細胞 OPM-2細胞系相關產(chǎn)品:NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞 ECC-12細胞系相關產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞 PC-9/S1細胞系相關產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞 E6-1細胞系相關產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞 Human ErythroLeukemia細胞系相關產(chǎn)品:EBC-1細胞、LAN6細胞、GM3570細胞 BEAS2B細胞系相關產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞 NCIH1395細胞系相關產(chǎn)品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞 SNU-878 epithelioid cells人肝癌細胞系 JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞 Eca-109細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL1細胞、H-522細胞、HCC94細胞 A-172 MG細胞系相關產(chǎn)品:HCC-827細胞、WRL68細胞、H378細胞 HEM-L細胞系相關產(chǎn)品:Z310細胞、RSC96細胞、D341MD細胞 "
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