"NCI-H1299 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：這株細(xì)胞來源于一個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。患者接受了初期放療。細(xì)胞均一性的部分缺失p５３蛋白，并缺少p５３蛋白表達(dá)。細(xì)胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1299 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞
Hs746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMC1細(xì)胞、TE-6細(xì)胞、U-87細(xì)胞
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代；３天傳代一次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
NCI-H1299 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣；多角形
購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
BRL3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-164細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細(xì)胞、GM-346細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞
PT-67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、C666-1細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞
Mel624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞
LS1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細(xì)胞、NCL-H548細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
KY-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B78細(xì)胞、H1688細(xì)胞、COV362細(xì)胞
HPAF-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞、Hs 832(C).T細(xì)胞
NCI-H1299 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞
OCI-AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-DZ細(xì)胞、MC9細(xì)胞、SW 837細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞、PBMC細(xì)胞
WPMY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞、VM Cub 1細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
MHH-CALL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞
H358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
EB-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細(xì)胞、U251n細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞
RMS 1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞、NCIH1693細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
BJAB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF767細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞、Hs739T細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
Jurkat clone A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細(xì)胞、RTMC細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
3T3-F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細(xì)胞、SK-LU-1細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞
SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞
DMS53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca-Ski細(xì)胞、L428細(xì)胞、H1836細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
NCI-H165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69C細(xì)胞、MC-4細(xì)胞、HPF細(xì)胞
MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞
Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞
SNU869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞、A2780CP70細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞
JAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞
HNEpC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、C4-I細(xì)胞
NCI-H2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細(xì)胞、BNL-HCC細(xì)胞、H-441細(xì)胞
HEC1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33A細(xì)胞、hA549細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細(xì)胞、CAL39細(xì)胞、NCI-522細(xì)胞
SUDHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細(xì)胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、RGC-5細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞
NCI-H1299 Adherent人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞
SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞
OE-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon26細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞、H250細(xì)胞
P3HR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU119細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞
Tb1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞
NCI-H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞
WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
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