"NCI-ADR-RES Adherent卵巢腺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-ADR-RES Adherent卵巢腺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
KYSE 410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
NCI-ADR-RES Adherent卵巢腺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
He-La細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1703細胞、J 82細胞、THP1細胞
SKO-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
HCC1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARIP細胞、BNL.CL2細胞、MM6細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
RERF-LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH6細胞、H-211細胞、RBL-I細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞
SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞
NCI-ADR-RES Adherent卵巢腺癌細胞系
H-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
HGC-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細胞、H510細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞
RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細胞、KNS-81細胞、NRK 49F細胞
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
COLO-824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 341細胞、Rat Skin 1細胞、M1細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
NCI-H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
T-ALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
A-1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
DC2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2-DAP細胞、PK136細胞、HNSC細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
NCIH1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
NCIH2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞
NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞
NGP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C1細胞、K299細胞、MRC-9細胞
NCI-ADR-RES Adherent卵巢腺癌細胞系
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
COR-L23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞
COLO 206細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1650細胞、MC-3T3-E1細胞、HEC-1-A細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL5細胞、BEAS 2B細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu 3細胞、OCM1A細胞、DHL-2細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細胞、beta-TC6細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
"