"NCI-ADR-RES epithelioid cells卵巢腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 RPMI.8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH250細(xì)胞、KYSE 50細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞 Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞 Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 NCI-ADR-RES epithelioid cells卵巢腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SUP-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞 C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞 HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞 SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞 U 937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細(xì)胞、N1S1細(xì)胞、HBdSMC細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-ADR-RES epithelioid cells卵巢腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞 Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞 HT144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細(xì)胞、COLO829細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞 T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞 Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞 PK-136細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1876細(xì)胞、NCI-H295細(xì)胞、DHL-8細(xì)胞 H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞 SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞 P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞 LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞 NCI-ADR-RES epithelioid cells卵巢腺癌細(xì)胞系 NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞 TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞 HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞 NCIH446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞 NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞 D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞 D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL1細(xì)胞、SAS細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞 MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞 HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N1S1細(xì)胞、M-07e細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞 KMST-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞 HCC0015細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV434細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞 SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞 H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞 Colo741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-410細(xì)胞、EnCa1細(xì)胞、TE671細(xì)胞 PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞 P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞 PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 Walker256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239細(xì)胞、SW-954細(xì)胞、HN4細(xì)胞 MDCK II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞 SCC VII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3-CA細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、MFE296細(xì)胞 BMSCs(mBMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-2OS細(xì)胞、Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞 ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞 NCI-SNU-886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA-1細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞 NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞 Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞 BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞、PL 45細(xì)胞 MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞 SupB15WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1944細(xì)胞、IGROV 1細(xì)胞、ME 180細(xì)胞 SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞 SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞 16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞 NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞 6-T CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:1.1B4細(xì)胞、TR146細(xì)胞、Walker256細(xì)胞 NR8383.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細(xì)胞、COC1/CDDP細(xì)胞、A2058細(xì)胞 HEK-AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KASUMI1細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞 HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞 HCC-1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2087細(xì)胞、ARH77細(xì)胞、KU 19-19細(xì)胞 IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞 NCI-H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE13細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞 H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞 CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞 ECV 304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL24細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞、THLE-2細(xì)胞 U-2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細(xì)胞、NCI-H2087細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞 Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞 A2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-480細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞、A7r5細(xì)胞 KTC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞、HCC-94細(xì)胞 R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞 Walker-256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞 L 428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU475細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞、QGP1細(xì)胞 HCEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe1細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞 W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞 NCI-ADR-RES epithelioid cells卵巢腺癌細(xì)胞系 WiDr/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb1細(xì)胞、MDCK (NBL-2)細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞 H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞 CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEND.3細(xì)胞、TK10細(xì)胞、293A細(xì)胞 HT144mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞 "
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