"BA/F3 Adherent小鼠原B細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個(gè)問題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BA/F3 Adherent小鼠原B細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
PTK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細(xì)胞、SUDHL-1細(xì)胞、Ramos (RA 1)細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞
Panc203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCH細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞、Human podocyte細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
BA/F3 Adherent小鼠原B細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:圓形
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細(xì)胞、KNS-42細(xì)胞、Eca109細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
UPCI-SCC-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細(xì)胞、SU-DHL-10細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
MeT-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-549細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞
HEK293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細(xì)胞、M21細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞
IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞
OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞
BA/F3 Adherent小鼠原B細(xì)胞系
P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細(xì)胞、CT26細(xì)胞、HEK293-EBNA1細(xì)胞
HIBEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細(xì)胞、DOK細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞
SCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞
SCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞、Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞
TE 671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細(xì)胞、RT4細(xì)胞、SACCLM細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
SUDHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-1細(xì)胞、OCI-Ly18細(xì)胞、LS123細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
Normal Rat Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526 mel細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞
SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞
ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞
MADISON LUNG TA-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
SACC-LM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC6細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞、Tu-177細(xì)胞
D-324MED細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 539細(xì)胞、A-875細(xì)胞、OE-33細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
HEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 4細(xì)胞、Adeno-293細(xì)胞、H2052細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
KNS62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK-2細(xì)胞、AML12細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞
MLE 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞、GM03569細(xì)胞
J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
KMB-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細(xì)胞、IOSE-80細(xì)胞、Med 283細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
RPMI No. 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2081細(xì)胞、MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、SK-OV-3細(xì)胞
EST50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1095Sk細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞、SKES1細(xì)胞
HEC1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細(xì)胞、GES1細(xì)胞、Bac12F5細(xì)胞
OSRC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL261細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞、CA-OV-3細(xì)胞
H-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2 ad細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、SK-BR3細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
639 V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD18細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞
MDA-MB-231-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:211H細(xì)胞、Co320細(xì)胞、HFF1細(xì)胞
NCIH508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC893細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞
L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞
BA/F3 Adherent小鼠原B細(xì)胞系
EA hy 926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、HS-68細(xì)胞
BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞
WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞
EC9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA hy 926細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞、McA-RH 8994細(xì)胞
HCET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H295R細(xì)胞、FM88細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞
H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
Huh7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細(xì)胞、MM96L細(xì)胞、LoMeT-ccRcc細(xì)胞
H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-6細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、SEM細(xì)胞
NE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
SUSM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 527細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞
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