"BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
OV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細(xì)胞、Hs 821.T細(xì)胞、PANC-03-27細(xì)胞
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞
MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時盡可能溫和,使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。
4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞
CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞
MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞
M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL-28細(xì)胞、T1-73細(xì)胞、Douglas Foster-1細(xì)胞
SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:懸浮生長
細(xì)胞形態(tài)特性:圓形
造成實驗室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
BpRcl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC7721細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞、SF-763細(xì)胞
Hs 840.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞、Human Liver-7702細(xì)胞
HBE135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERIRb1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞、GalK1細(xì)胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
SUNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞、NCIH446細(xì)胞
OCUM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-157細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞、HEK (AD293)細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細(xì)胞系
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞
HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞
MC9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD1112Sk細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞、0V-1063細(xì)胞
MCA 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1417細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞、SCL1細(xì)胞
EoL-1-cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL細(xì)胞、H-1048細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞
Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞
Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞
Human Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1975細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞、H-1876細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細(xì)胞、RH-30細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
Neuro-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細(xì)胞、IOSE80細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞
NBL-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812F細(xì)胞、M14細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
Swiss-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1688細(xì)胞、Capan2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞
AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
Clone 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細(xì)胞、HET1A細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞
Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞
H-2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1197細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
DI-TNC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞
NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞
CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞
PANC 203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE4細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞、L-WRN細(xì)胞
BHT101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-7細(xì)胞、MB231細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ketr-3細(xì)胞、HAPI細(xì)胞、C-6細(xì)胞
IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞
IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞
HEK 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞
SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
SHZ-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
NT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細(xì)胞、C 643細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞
BA/F3 epithelioid cells小鼠原B細(xì)胞系
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373-MG細(xì)胞、G-402細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
HLEB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1細(xì)胞、SNU449細(xì)胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞
NGEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
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