"HCC15 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
HFF-1細胞系相關產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
SKNBE(2c)細胞系相關產(chǎn)品:Melan-a細胞、HCA 7細胞、NCI-H522細胞
MC3T3-E1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2228細胞、RAW-264.7細胞、Hs 729T細胞
細胞生長:貼壁
HCC15 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
OSC19細胞系相關產(chǎn)品:BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞系相關產(chǎn)品:HFB細胞、PL-5細胞、MCF 7B細胞
Ej138細胞系相關產(chǎn)品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
Jurkat-77細胞系相關產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
P3HR1-BL細胞系相關產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC15 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
J 82細胞系相關產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
GCT細胞系相關產(chǎn)品:BRL-3A細胞、M1細胞、EFM-192B細胞
OCI-Ly1細胞系相關產(chǎn)品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
CC-LP-1細胞系相關產(chǎn)品:HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
KMM-1細胞系相關產(chǎn)品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
SK-RC 42細胞系相關產(chǎn)品:SW 13細胞、Hs 870.T細胞、USMC細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
BCP-1細胞系相關產(chǎn)品:P3X63Ag8-6-5-3細胞、High-5細胞、H-810細胞
RKOE6細胞系相關產(chǎn)品:SUM 190PT細胞、BCECs細胞、BC-3-H-I細胞
HCC15 epithelioid cells人肺癌細胞系
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
VMM-5A細胞系相關產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
HO8910PM細胞系相關產(chǎn)品:TGBC-11-TKB細胞、SK.MEL.5細胞、NCI-H220細胞
L615細胞系相關產(chǎn)品:GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
IEC-6細胞系相關產(chǎn)品:AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
COLO829細胞系相關產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
COLO829細胞系相關產(chǎn)品:HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
SG231細胞系相關產(chǎn)品:K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
WM266細胞系相關產(chǎn)品:KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
SK-MEL-5細胞系相關產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
MPP 89細胞系相關產(chǎn)品:KY180細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞、INS1細胞
786-O細胞系相關產(chǎn)品:P-19細胞、Y3M細胞、KU812-F細胞
C17細胞系相關產(chǎn)品:MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
HCEpiC細胞系相關產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
NW-MEL-38細胞系相關產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
SKO3細胞系相關產(chǎn)品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
SUNE-1細胞系相關產(chǎn)品:D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
PLA802細胞系相關產(chǎn)品:CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
MDBK細胞系相關產(chǎn)品:ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
HOPC細胞系相關產(chǎn)品:UACC-893細胞、Normal Rat Kidney細胞、H209細胞
F-36P細胞系相關產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞
OUMS-23細胞系相關產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
HT55細胞系相關產(chǎn)品:SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
NCI-322細胞系相關產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
GM03190細胞系相關產(chǎn)品:H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
RMG-I細胞系相關產(chǎn)品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
Mino細胞系相關產(chǎn)品:EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
LY細胞系相關產(chǎn)品:H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
SW 527細胞系相關產(chǎn)品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞
LX-2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞
B-CPAP細胞系相關產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
HT-115細胞系相關產(chǎn)品:32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
HOP-92細胞系相關產(chǎn)品:L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
UPCISCC154細胞系相關產(chǎn)品:FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
LS 180細胞系相關產(chǎn)品:HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
NCI-H1341細胞系相關產(chǎn)品:SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
hTERTHME1細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-3細胞、PaCa2細胞、LY-R細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關產(chǎn)品:18G3.cl 1細胞、NCIH226細胞、Pa16C細胞
C127細胞系相關產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
SUDHL-8細胞系相關產(chǎn)品:SK-MEL-1細胞、OCI-Ly18細胞、LS123細胞
SU-DHL2細胞系相關產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
TCCPAN2細胞系相關產(chǎn)品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
H4-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
MUTZ-1細胞系相關產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
GM03569細胞系相關產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產(chǎn)品:F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
Strain V細胞系相關產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
HCC15 epithelioid cells人肺癌細胞系
Y3-Ag123細胞系相關產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
OVCAR5細胞系相關產(chǎn)品:SK-NSH細胞、RPMI 6666細胞、Caco2BBe細胞
H-1395細胞系相關產(chǎn)品:A549-Taxol細胞、PC-3M-IE8細胞、NCI-522細胞
OCI-Ly1細胞系相關產(chǎn)品:THPI細胞、NCI-H-69細胞、HuPT4細胞
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