"NCI-H2171 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2171 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經驗總結,這里說一些我個人的經驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結的一些經驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結經驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關鍵所在(雖然很重要),關鍵所在是細胞來源,血清質量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
H1882細胞系相關產品:HONE1細胞、L cell細胞、LY細胞
WILL2細胞系相關產品:H-128細胞、CORL279細胞、OVCAR-4細胞
HT-55細胞系相關產品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞
細胞傳代方法:3-4天換液1次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MLMA細胞系相關產品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞
HCC-2218細胞系相關產品:WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
GM04679細胞系相關產品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
細胞生長特性:懸浮生長
NCI-H2171 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:聚團懸浮
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
SCLC-21H細胞系相關產品:SPCA-1細胞、NCIH2107細胞、231-luc細胞
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MM1.S細胞系相關產品:TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關產品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
BV2細胞系相關產品:KYSE 520細胞、HCC-2108細胞、SKG3A細胞
MCF7-GFP細胞系相關產品:P3/NS-1細胞、SW 1353細胞、CCRF-CEM C1細胞
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CCD 19Lu細胞系相關產品:TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
THLE-3細胞系相關產品:Human podocyte細胞、SKMES細胞、95D細胞
SUD-4細胞系相關產品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
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HuH-6細胞系相關產品:CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
TE 354.T細胞系相關產品:NFHIOSE-80細胞、EB-1細胞、RPMI 7951細胞
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BJAB-1細胞系相關產品:SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
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OCI-AML3細胞系相關產品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
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BT549細胞系相關產品:HEC1-A細胞、U343MG細胞、DMS79細胞
HCCLM6細胞系相關產品:LM3細胞、639 V細胞、Capan 2細胞
10RGB細胞系相關產品:OCM1A細胞、TKB-1細胞、CEM-T4細胞
TI-73細胞系相關產品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞系相關產品:Mono Mac 6細胞、HOS-MNNG細胞、LN-229細胞
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H2330細胞系相關產品:MeT-5A細胞、OEC19細胞、hTERTHME1細胞
Hep G2-Luc細胞系相關產品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
SUDHL10細胞系相關產品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
MV4-11細胞系相關產品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
CPA47細胞系相關產品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
HTori-3細胞系相關產品:LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
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CHAGOK1細胞系相關產品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
Mono Mac6細胞系相關產品:138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
Hs840T細胞系相關產品:BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產品:KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
ARO 81-1細胞系相關產品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
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NCIH446細胞系相關產品:Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
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RPMI.8226細胞系相關產品:NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞
NOR 10細胞系相關產品:Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
Tn5B1-4細胞系相關產品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、B16/F10細胞、RCC10RGB細胞
NW38細胞系相關產品:H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
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OS-RC-2細胞系相關產品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
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H865細胞系相關產品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
H2198細胞系相關產品:Malme3M細胞、870細胞、NPA87-1細胞
SVOG細胞系相關產品:Panc-1-P細胞、P-2003細胞、HEC-1A細胞
SKCO1細胞系相關產品:PC3M-1E8細胞、IEC 18細胞、HLE-SRA-01/04細胞
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