"NCI-H2171 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
SNU878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細(xì)胞、CMECs細(xì)胞、A-875細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
NCI-H2171 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：３-４天換液１次。
RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞
Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞
HCC0070細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1395細(xì)胞、TO 175.T細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2171 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
細(xì)胞形態(tài)特性：聚團(tuán)懸浮
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實驗穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
Ca-Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM1215細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞、L-1210細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
MDA-MB-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細(xì)胞、FU-MMT-1細(xì)胞、Walker256-TC細(xì)胞
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
LC-2-Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細(xì)胞、HLFa細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
HPB-ALL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細(xì)胞、H3396細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞
LTEP a2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG 8.653細(xì)胞、870細(xì)胞、Malme-3 M細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
NCI-H2171 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
Tb 1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-HCC細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞、GM07404D細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
Hs343T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon 26細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞
RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞
COLO 680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細(xì)胞、J45.01細(xì)胞、5637細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
SKNSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 432細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞、AR41P細(xì)胞
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、U373MG細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
NRK 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細(xì)胞、YAC-1細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞
beta TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細(xì)胞、HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、STTG1細(xì)胞
HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞
NCIH650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2 wt細(xì)胞、T 24細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞
NCIH2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FD-LSC-1細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞
COLO684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細(xì)胞、MDA134細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞
CMT 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞、NEC8細(xì)胞
OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV-173細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞
CA-46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-95-8細(xì)胞、Daoy細(xì)胞、9L細(xì)胞
RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SSP-25細(xì)胞、H6c7細(xì)胞、HANK細(xì)胞
P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細(xì)胞、VERO C 1008細(xì)胞、H-2122細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
M619細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H498細(xì)胞、PC-10細(xì)胞、UM-RC-2細(xì)胞
GM05384細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE1細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞、SW403細(xì)胞
Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞
Daudi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞
SU86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
TFK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ID8細(xì)胞、H520細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
MCF 7B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞、Hep 2細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
NCI-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos-2G6-4C10細(xì)胞、CHG5細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
DAN-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aNK細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞、Ramos-2G6-4C10細(xì)胞
PCI-4.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細(xì)胞、D-283細(xì)胞、DMS114細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
MDA-MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hUC-MSC細(xì)胞、CZ-1細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞
SK-N-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP-1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞、CCRF細(xì)胞
HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞
RPMI2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H747細(xì)胞、HEC-1-A細(xì)胞、HS688AT細(xì)胞
NCI-H2171 epithelioid cells人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、RL952細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
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