"H4-II-E epithelioid cells大鼠肝細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
HLE-SRA-01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2.03細胞、CEMC7細胞、NTera 2細胞
NCIH522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
OVCA-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS細胞、NCC-IT細胞、Bowes melanoma cells細胞
細胞生長:貼壁
H4-II-E epithelioid cells大鼠肝細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
Hs821T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞
MG63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H4-II-E epithelioid cells大鼠肝細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
SW-1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細胞、C17細胞、PL45細胞
RINm5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO1細胞、U138MG細胞、SKHEP-1細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
Tn 5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2029細胞、OV1/P細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
JAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
P3-X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac 6細胞、SU-DHL-6細胞、BEL7405細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR4細胞、BJA-B細胞、H1882細胞
H4-II-E epithelioid cells大鼠肝細胞系
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
BrCL15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep II細胞、Cates 1B細胞、P388-D1細胞
NCCIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
H-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
32D:cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage OL細胞、LS174細胞、HepG2/C3A細胞
HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H187細胞、Astrocyte type I clone細胞、TE-12細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
aTC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115mel細胞、P31FUJ細胞、RCC-4細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
AR4IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
NOR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
MDA-MB-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
ETCC007細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細胞、Panc 08.13細胞、RCS細胞
LIM-1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
SUDHL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細胞、JIMT-1細胞、COS1細胞
AgC11x3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
UMR 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細胞、BSC1細胞、PC-3M-IE8細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
HOS-MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB1細胞、HUC細胞、H187細胞
B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
MESSADX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME 3M細胞、CHL/IU細胞、P3-X63.Ag8.653細胞
HTR-8/SV-neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H1666_DA細胞
CBRH7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP100細胞、MDA-PCa-2b細胞、BT 325細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
C666-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
Hs839.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC154細胞、VMM39細胞、Becker細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細胞、H-1869細胞、L363細胞
NIH:OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly8細胞、CHL-1細胞、DK-MG細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
MPC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細胞、CCRF.CEM細胞、H-2052細胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞
SK-MEL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞
DMS 114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細胞、BrCL12細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
H4-II-E epithelioid cells大鼠肝細胞系
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C41細胞、GM04154細胞、SNU119細胞
SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、NCIH2405細胞、HepG2/C3A細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE-1細胞、U-118MG細胞、WERIRb1細胞
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