"BC-009 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞
SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKAC1細胞、SNT-8細胞、C8-D1A細胞
細胞生長：貼壁
BC-009 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前，細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存：使用分離試劑從基層分離細胞，分離時盡可能溫和，使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細胞，確定有活力細胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細胞/ml密度，在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以１℃/分鐘進行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
SGC-996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細胞、HCET細胞、LAN1細胞
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
BC-009 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
CAL 62細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞
SVG p12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1688細胞、HEP3B2細胞、CAL78細胞
WM-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1944細胞、MHHCALL2細胞、SK-BR-3細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
H2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812F細胞、MUVEC細胞、SuDHL 8細胞
BC-009 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
Hs-606-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES1細胞、NCIH1838細胞、LP-1細胞
HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
526-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細胞、LLC-MK2細胞、JROECL 19細胞
Tu-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞
Evsa T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-539細胞、U138細胞、IOSE 80細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
QGY7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞
RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞
Bac 1.2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細胞、K422細胞、NTERA-2cl.D1細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
ES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML5細胞、ChaGo-K1細胞、32D/cl3細胞
143 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
2780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1 Clone 6細胞、T-47D細胞、HCC-1428細胞
AC29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細胞、H8細胞、GM3190細胞
T98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細胞、CF PAC-1細胞、MV-4-11細胞
NCI-H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
RPMI #1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE37細胞、HSC4細胞、HS578T細胞
LIM-1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
BpRc1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
BC-009 epithelioid cells人乳腺癌細胞系
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF.CEM細胞、DoHH-2細胞、LTEP a2細胞
NCIH1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細胞、K 562細胞、H2029細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy 926細胞、COV-362細胞、EFM192A細胞
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