"A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候對一般細胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
OCI-Ly 3細胞系相關產(chǎn)品：32Dc3細胞、LA 4細胞、SR-786細胞
MCFs細胞系相關產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
YT細胞系相關產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
細胞生長：貼壁
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應帶有防護眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細胞懸液，裝入離心管中，再補加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉/分）５分鐘，取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細胞實驗室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細胞回溫至３７°C，并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中，或細胞已長滿盤，則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Neuro-2a細胞系相關產(chǎn)品：HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
CTV1細胞系相關產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
B16BL6細胞系相關產(chǎn)品：HEI193細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞、MSF細胞
BE(2)-M17細胞系相關產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
H520細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
SKES-1細胞系相關產(chǎn)品：EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SVGp12細胞系相關產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
TE671細胞系相關產(chǎn)品：AU-Mel細胞、SK.MEL.28細胞、Y3.AG.1.2.3細胞
CII細胞系相關產(chǎn)品：MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞
OVCAR 432細胞系相關產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品：TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞
NOZ細胞系相關產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
GM17219細胞系相關產(chǎn)品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
NBL-S細胞系相關產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
MHCC97-L細胞系相關產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細胞系
NCI-HUT-125細胞系相關產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
A 2780 CP細胞系相關產(chǎn)品：SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
Panc2.03細胞系相關產(chǎn)品：AMJ2-C8細胞、U266BL細胞、C 6細胞
Farage OL細胞系相關產(chǎn)品：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
NK92MI細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
NK92MI細胞系相關產(chǎn)品：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
WM2664細胞系相關產(chǎn)品：A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞
NIH/3T3細胞系相關產(chǎn)品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
TE14細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
RKO_AS45細胞系相關產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
hMSC-BM細胞系相關產(chǎn)品：YT細胞、FAO-1細胞、NCIH1755細胞
C8161細胞系相關產(chǎn)品：H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
MKN-28細胞系相關產(chǎn)品：H820細胞、Japanese Tissue Culture-39細胞、HTh 74細胞
HepG2-luc細胞系相關產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
AM-38細胞系相關產(chǎn)品：NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
CHAGOK1細胞系相關產(chǎn)品：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
MDA453細胞系相關產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
Hi5細胞系相關產(chǎn)品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
L5178Y-R細胞系相關產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
BNL-HCC細胞系相關產(chǎn)品：Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
SuDHL 10細胞系相關產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
C33細胞系相關產(chǎn)品：2B4細胞、B16-F10--RED細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞
TB-1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞
OKa-C-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
CAL-85-1細胞系相關產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
Karpas 422細胞系相關產(chǎn)品：WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
RS4-11細胞系相關產(chǎn)品：H1688細胞、H-292細胞、C-643細胞
16-HBE14o細胞系相關產(chǎn)品：SN12-PM6細胞、HEC1-B細胞、P-388D1細胞
HT1376細胞系相關產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
H28細胞系相關產(chǎn)品：H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞
RBL 2H3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
A-172MG細胞系相關產(chǎn)品：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
CCD966SK細胞系相關產(chǎn)品：KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
HDSMC細胞系相關產(chǎn)品：LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
H-1693細胞系相關產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
HUT 226細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
IGR-OV1細胞系相關產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
WM 451-Lu細胞系相關產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
LS 180細胞系相關產(chǎn)品：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
CORL51細胞系相關產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
HCC-2218細胞系相關產(chǎn)品：WRL 68細胞、SCC4細胞、RT-BM 1細胞
MOLM13細胞系相關產(chǎn)品：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
TN5B14細胞系相關產(chǎn)品：MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
J111細胞系相關產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
A-253 epithelioid cells人唾液腺腫瘤細胞系
624mel細胞系相關產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
H1836細胞系相關產(chǎn)品：H-1581細胞、FRH-0201細胞、NHLF細胞
KOSC-2細胞系相關產(chǎn)品：OAW42細胞、HFTF細胞、FCCH1024細胞
TE671細胞系相關產(chǎn)品：AU-Mel細胞、WI-38細胞、DHL6細胞
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