"DMS 114 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DMS 114 Adherent人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
常規(guī)的細胞實驗(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗,比如病毒包裝,對細胞代數(shù),對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細胞,添加多一些EDTA,就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞,不需要配制如此溶液。
NCI-SNU-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHH細胞、NTERA-2細胞、T98細胞
RPMI 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112細胞、Fetal Human Colon細胞、NCI-H1437細胞
RCC 786-O細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM95細胞、NCI-H1869細胞、T-84細胞
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
細胞生長特性:貼壁生長
DMS 114 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
Ha Fe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
MC-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1428細胞、C3A細胞、Hs 683細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
MHCC97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK N SH細胞、BPH1細胞、LN299細胞
DMS 114 Adherent人肺癌細胞系
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
NCI H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細胞、C4-2B細胞、SCCVII細胞
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
67NR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
DV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞、Duck embryo細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
NCI-H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sol8細胞、Colo-678細胞、H-2135細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
OVCA 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 80細胞、RT-112細胞、NK92MI細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
HEK.EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細胞、WM115F細胞、NCIH226細胞
ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞
4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
Hs819T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
SNU368細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-4細胞、GM02219細胞、Detroit562細胞
H-2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 4細胞、BCaP-37細胞、HeLa/DDP細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF-7細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、NCI-H2196細胞
HCC-9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNGHOS細胞、Sp2/0-Ag-14細胞、FTC-133細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
PC12(高分化)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細胞、HO-1-N-1細胞、PC3細胞
AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
DMS 114 Adherent人肺癌細胞系
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細胞、CCFSTTG1細胞、J774A1細胞
GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1373細胞、BSC-40細胞、OCI-LY-7細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
HEK-293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細胞、Jiyoye(P-2003)細胞、High 5細胞
Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細胞、H-1373細胞、JURKAT E-61細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、CPAE細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、HEK293F細胞、87 MG細胞
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