"DMS 273 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DMS 273 Adherent人小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內,依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
BL1339細胞系相關產品:L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
RenCa細胞系相關產品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
RBL-I細胞系相關產品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
NCIH2347細胞系相關產品:SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞
WRL-68細胞系相關產品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
MPVECs細胞系相關產品:WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
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細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
YD-38細胞系相關產品:H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關產品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞
C6細胞系相關產品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
LIXC002細胞系相關產品:OCI/AML4細胞、Becker細胞、PC2細胞
SF295細胞系相關產品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
Ca 9-22細胞系相關產品:Caco-2 BBe細胞、CHL細胞、CHP212細胞
HCT_116細胞系相關產品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞
ChaGo-K-1細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
BTI-TN5B1-4細胞系相關產品:HASMC細胞、NTera 2/cl.D1細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞
LA-N-6細胞系相關產品:NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞
RK13細胞系相關產品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
H-2170細胞系相關產品:WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
Tb 1-Lu細胞系相關產品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
DMS 273 Adherent人小細胞肺癌細胞系
HCC 94細胞系相關產品:624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
BT483細胞系相關產品:SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關產品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關產品:P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
ARO 81-1細胞系相關產品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞
HUSMC細胞系相關產品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
766T細胞系相關產品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
HIT clone T15細胞系相關產品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
H2347細胞系相關產品:ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
GM04678細胞系相關產品:P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
UMRC-2細胞系相關產品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
SU4細胞系相關產品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關產品:HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
OCI-Ly 7細胞系相關產品:H220細胞、253J-BV細胞、Tsup-1細胞
HCC1419細胞系相關產品:Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞、LC-1Sq細胞、SK-RC 52細胞
Panc04.03細胞系相關產品:NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞
Caco-2/ATCC細胞系相關產品:NCI-H1944細胞、R D細胞、SUD4細胞
FAT細胞系相關產品:Dunn LM8細胞、IPLB-SF 21AE細胞、H1650_CO細胞
GA-10細胞系相關產品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
M059K細胞系相關產品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
NALM 6細胞系相關產品:MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
L-5178-Y細胞系相關產品:Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
SKNEP1細胞系相關產品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞
WERIRb1細胞系相關產品:Clone 15 HL-60細胞、HCC0070細胞、Ly18細胞
TE 85.T細胞系相關產品:BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
OV-CA 432細胞系相關產品:KLM-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞、OP-9細胞
SL-1細胞系相關產品:C22 (Clara)細胞、H-2342細胞、HBL100細胞
HN-6細胞系相關產品:ANA-1細胞、MDA-MB 453細胞、OSA細胞
HSC-I細胞系相關產品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
UCLA-SO-M14細胞系相關產品:C22細胞、NCIH1563細胞、MLE 12細胞
SHG44細胞系相關產品:HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞
Vero 76細胞系相關產品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
L-Wnt3A細胞系相關產品:Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
MA-782細胞系相關產品:NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
HTori3細胞系相關產品:GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
COLO 678細胞系相關產品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
ECC12細胞系相關產品:HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
LAD 2細胞系相關產品:GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
OCI-Ly1細胞系相關產品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞
3T3 clone A31細胞系相關產品:EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
HCC202細胞系相關產品:NKM1細胞、WEHI 164 TC細胞、SUDHL16細胞
TGBC11TKB細胞系相關產品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞
DMS 273 Adherent人小細胞肺癌細胞系
SNU-216細胞系相關產品:MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
JVM2細胞系相關產品:YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞
DU-145細胞系相關產品:HRGEC細胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、Hx-147細胞
HEB細胞系相關產品:KMS26細胞、H-847細胞、EB1細胞
Fu97細胞系相關產品:KRC/Y細胞、T 84細胞、LN 229細胞
A253細胞系相關產品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞
DMS153細胞系相關產品:PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
HEK293-A細胞系相關產品:UPCI:SCC154細胞、H-2170細胞、C-4-I細胞
H.Ep.-2細胞系相關產品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
Ca759細胞系相關產品:130T細胞、Hepa-RG細胞、H2135細胞
H-548細胞系相關產品:HHL-5細胞、OV90細胞、QGY細胞
C6細胞系相關產品:NCIH1975細胞、SW1088細胞、Colo16細胞
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