"NCI-H2023 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
懸浮細胞不容易轉染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染,其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑,脂質體轉染是基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率,可以使用非脂質體的轉染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉染方法,針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2023 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代培養(yǎng)(消化法)標準操作規(guī)程【原理】細胞在培養(yǎng)瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續(xù)生長,同時也將細胞數(shù)量擴大,就必須進行傳代(再培養(yǎng))。傳代培養(yǎng)也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶?!静牧虾驮噭浚?無菌生理緩沖液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分裝于15 ml無菌離心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回溫;3)新鮮培養(yǎng)基;4)無菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶【傳代前準備操作】1)預熱培養(yǎng)用液:把已經配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱;2)用75%酒精擦拭經過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染;4)點燃酒精燈:注意火焰不能太?。唬?準備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶;6)取出預熱好的培養(yǎng)用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內;7)從培養(yǎng)箱內取出細胞:注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞;8)打開瓶口:將各瓶口一一打開,同時要在酒精燈上燒口消毒。
LN299細胞系相關產品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞
RH7777細胞系相關產品:KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
YAC-1細胞系相關產品:THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
細胞傳代方法:每周換液2次
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HGE細胞系相關產品:Hs343T細胞、ECGI10細胞、A-2058細胞
ONS-76細胞系相關產品:3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
Anip-973細胞系相關產品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
NCI-H2023 Adherent人非小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細胞時,發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因導致,我們該怎么進行解決?以下是國內外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題,總結的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細胞裂解,推薦的解決方案:可預期到一定量的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長,存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。
SuperTube細胞系相關產品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
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C3A細胞系相關產品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
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PTK-2細胞系相關產品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
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PF-382細胞系相關產品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞
A10細胞系相關產品:SK-MEL2細胞、alphaTC clone 6細胞、OV90細胞
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HSAS3細胞系相關產品:PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
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H-2087細胞系相關產品:PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
MC 3T3-E1細胞系相關產品:SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
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S.B.細胞系相關產品:BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
L- cell細胞系相關產品:UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞
GBC-SD細胞系相關產品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
MUS-M1細胞系相關產品:KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
Mono-Mac-6細胞系相關產品:KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
CAL51細胞系相關產品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
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Jurkat E6.1細胞系相關產品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
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JB6 Cl 30細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HSC2細胞、Hs604T細胞
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