"NCI-H1993 Adherent人肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解:1)收到細胞,首先要鏡檢:觀察細胞形態(tài)是否正常,對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細胞密度,有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化,很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會發(fā)生大片的脫落,細胞聚集在一起,但是細胞生長還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察,細胞初步?jīng)]有問題時,進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時,則處理如下:棄除瓶中大部分培養(yǎng)基,僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基;或更換新鮮的培養(yǎng)基,置于培養(yǎng)箱中,隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下,會調(diào)整為靜止期,或者慢速生長期,恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右,才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài),在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率,和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%,并且細胞狀態(tài)很好時,則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快,狀態(tài)穩(wěn)定,不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶;對于生長較慢,細胞比較薄,狀態(tài)容易波動的細胞類型,一次少傳些,每瓶細胞密度大些,便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞,次處理也可以依照第二種情況。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H1993 Adherent人肺癌細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
EnCa1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
WPE-int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞
細胞傳代方法:1:2—1:6傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Bovine Turbinate細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細胞、TCC-PAN2細胞、RPMI-1846細胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC VII細胞、OCI/AML5細胞、MONO-MAC 6細胞
alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
NCI-H1993 Adherent人肺癌細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中;2)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
SKO3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細胞、NCIH460細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
H1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB.4細胞、HPBALL細胞、HuTu 80細胞
NS-I/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
Nb2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細胞、PIGI細胞、Kato-III細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
ANA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細胞、Rat 2細胞、NCI-460細胞
SKMEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H146細胞、NCI-ADR-RES細胞、COV434細胞
U87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細胞、C3H10T1-2細胞、C33-A細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
NCI-H1993 Adherent人肺癌細胞系
HCC1599細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
My-La 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞
NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞
VP 267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
Sci-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip-973細胞、EC-9706細胞、ECC 10細胞
NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
KMST-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT93細胞、Human ErythroLeukemia細胞、H-211細胞
H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
LTEPsm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細胞、ONS76細胞、LC-1/sq細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
H-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
Rat Skin 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
Hep G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
SUDHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細胞、B16 BL6細胞、SW1271細胞
PaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
KY-270細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細胞、H1688細胞、COV362細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
CPA47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
NCI-H1993 Adherent人肺癌細胞系
WM 239A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164 TC細胞、NCI-H1672細胞、JHH-2細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
Alexander細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞
KNS-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細胞、SK-N-BE(2)細胞、MNNG/HOS細胞
NCIH748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞、SUDHL-10細胞
NHRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB(HCF)細胞
SMMC-7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoN細胞、OCILY3細胞、MODE-K細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0WT細胞、AGS細胞、Vero 76 clone E6細胞
H-1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S180細胞、SUM52細胞、NCI-H508細胞
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