"SF126 Adherent人腦瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞來(lái)源于星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤；膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）陰性；可以特異地結(jié)合β-內(nèi)啡肽。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤(pán)皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
SF126 Adherent人腦瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我常看到一個(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽(tīng)說(shuō)，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來(lái)的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過(guò)的近３００株細(xì)胞里面，還沒(méi)遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒(méi)養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒(méi)消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過(guò)程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來(lái)越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
NCI-H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、NOZAWA細(xì)胞、Colo16細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代；３-４天１次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
Capan 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細(xì)胞、NCI-H128細(xì)胞、ACC-3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
SF126 Adherent人腦瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
RT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-118-MG細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞、SVOG細(xì)胞
H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細(xì)胞、H596細(xì)胞、OCM-1細(xì)胞
OE-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞
NCI H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞
C3H/10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT-1細(xì)胞、SF763細(xì)胞、RTMC細(xì)胞
Vero 76 clone E-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細(xì)胞、JEKO細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞
RGC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-295細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞
H4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞
SF126 Adherent人腦瘤細(xì)胞系
Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞
EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM1900細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、769P細(xì)胞
H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞
K7M2-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、CMT93細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
HUV-EC-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細(xì)胞、H1184細(xì)胞、H2444細(xì)胞
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
SW 1353細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細(xì)胞、H-128細(xì)胞、LAPC4細(xì)胞
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
DK-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細(xì)胞、NRCC細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞
RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞
H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞
B16F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-FT細(xì)胞、NCI H2106細(xì)胞、MLA144細(xì)胞
CACO2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG231細(xì)胞、HFB細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞
M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBCSD細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞、H676B細(xì)胞
OCI-AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞
H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPT-1細(xì)胞、Hmy.2 CIR細(xì)胞、H1651細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
SF126 Adherent人腦瘤細(xì)胞系
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
K562/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCMS細(xì)胞、PG-4細(xì)胞、HSC-I細(xì)胞
SCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細(xì)胞、SMA 560細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞
HN 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
HOS-MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB1細(xì)胞、HUC細(xì)胞、H187細(xì)胞
NB.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL 124細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、S-16細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞
OE-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC1細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
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