"GI-1 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
GI-1 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標(biāo)準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
HCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
OCI-LY-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS17/2.8細胞、MCA38細胞、HCC-9724細胞
細胞生長特性：貼壁生長
GI-1 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系
細胞形態(tài)特性：上皮樣
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
LMTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞
Human Liver-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
BHP 10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞
H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
MDA-MB-435 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞
TE13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1944細胞、GM05372細胞、CT26.CL25細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
MDAMB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL140細胞、SUM 149PT細胞、PC3-M細胞
GI-1 Adherent人神經(jīng)膠質(zhì)瘤和肉瘤細胞系
MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞
C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
HCC-2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
MT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
4T1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92.1.7細胞、BT-325細胞、H650細胞
Panc 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TH1細胞、H711細胞、RN細胞
2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
ASPC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細胞、TE671/RD細胞、MFM223細胞
SW480細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEpiC細胞、SK-LMS-1細胞、TK-1細胞
NCI-H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
BrCL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞
M-1 myeloid leukemia細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細胞、H69/P細胞、RAT2細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
L-M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
SNGM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
Hs888 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞
PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞
H-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
P 3 HR 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細胞、Monomac-1細胞、NCI-HUT-460細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
SK Mel 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 5細胞、MUG-Chor1細胞、SW-579細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
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COR-L23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF Pac1細胞、J774A1細胞、NFS 60細胞
COS7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 cl. A31細胞、HR1K細胞、Vx2細胞
LC-1-sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH35細胞、P30OHK細胞、Panc_03_27細胞
HCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細胞、MOLP8細胞、HO1-N1細胞
P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
NCI-H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞
SUM-52PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細胞、LLC-PK1細胞、U-226AR1細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、BGC823細胞、CTV1細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、KYSE520細胞、REC細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細胞、YTMLC-90細胞、LAN6細胞
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